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人参皂苷Compound K调控STAT3诱导肝癌细胞凋亡的内质网应激作用机制

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摘要

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第一章引言

1.1肝癌的发病及治疗现状

1.1.1肝癌的发病现状

1.1.2肝癌的药物治疗研究现状

1.2 STAT3与肝癌的研究进展

1.2.1 STAT3概述

1.2.2 STAT3与抗肝癌研究现状

1.3内质网应激与细胞凋亡

1.3.1内质网应激概述

1.3.2内质网应激相关的细胞凋亡信号通路

1.3.3.内质网应激相关的凋亡蛋白

1.4人参皂苷的分类及Compound K的药理作用研究进展

1.4.1人参皂苷的分类及研究现状

1.4.2人参皂苷CK的发现与制备

1.4.3人参皂苷CK的药理作用研究进展

1.5结语

2.1.1实验细胞

2.1.2实验动物

2.1.3主要实验试剂

2.1.4主要实验仪器

2.2实验方法

2.2.1细胞培养与增殖实验

2.2.2平板克隆实验

2.2.3 Hoechst染色

2.2.4免疫荧光染色

2.2.5 Annexin V/PI双染法流式细胞凋亡检测

2.2.6免疫细胞化学实验

2.2.7免疫组织化学实验

2.2.8凝胶迁移率实验

2.2.9 CRISPR/Cas9介导的STAT3基因敲除实验

2.2.10 STAT3过表达质粒转染

2.2.11裸鼠移植瘤模型建立方法

2.2.12 Western Blot实验

2.2.13移植瘤形态学染色

2.3数据处理与分析

第三章实验结果

3.1人参皂苷CK对人肝癌细胞增殖的抑制作用

3.1.1人参皂苷CK对不同肝癌细胞及正常肝细胞增殖的影响

3.1.2人参皂苷CK对肝癌细胞的克隆集落形成的作用

3.2人参皂苷CK对人肝癌HepG2及SMMC-7721细胞凋亡的作用

3.2.1人参皂苷CK对人肝癌HepG2及SMMC-7721细胞凋亡的影响

3.2.2人参皂苷CK对人肝癌HepG2及SMMC-7721细胞凋亡蛋白表达的影响

3.3人参皂苷CK对人肝癌细胞STAT3的活化表达的影响

3.3.2人参皂苷CK对人肝癌HepG2及SMMC-7721细胞p-STAT3蛋白表达影响

3.3.3人参皂苷CK对STAT3-DNA结合活性的作用

3.4人参皂苷CK对肝癌细胞内质网应激的诱导作用

3.4.1人参皂苷CK对人肝癌HepG2及SMMC-7721细胞中内质网应激相关蛋白表达的影响

3.4.2人参皂苷CK诱导人肝癌细胞凋亡与内质网应激相关

3.5人参皂苷CK对敲除STAT3肝癌细胞中凋亡及内质网应激的作用

3.5.1 STAT3敲除后HepG2及SMMC-7721细胞中STAT3表达

3.5.2人参皂苷CK对STAT3敲除的HepG2及SMMC-7721细胞凋亡的作用

3.5.3人参皂苷CK对STAT3敲除的HepG2及SMMC-7721细胞中内质网应激及凋亡蛋白表达的作用

3.6人参皂苷CK对过表达STAT3肝癌细胞中凋亡及内质网应激的作用结果

3.6.2人参皂苷CK对过表达STAT3肝癌HepG2和SMMC-7721细胞的凋亡作用

3.6.3人参皂苷CK对过表达STAT3肝癌HepG2及SMMC-7721细胞中内质网应激的作用

3.7人参皂苷CK对裸鼠移植瘤生长的抑制作用

3.7.1人参皂苷CK对裸鼠移植瘤生长的作用

3.7.2人参皂苷CK对裸鼠移植瘤细胞凋亡作用

3.7.3人参皂苷CK对裸鼠移植瘤细胞中STAT3及内质网应激相关蛋白表达的影响

第四章讨论

结论

参考文献

致谢

附录

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