胚胎提取物诱导体外培养肿瘤细胞凋亡的实验研究

摘要

恶性肿瘤是威胁人类健康和生命的顽症，近些年来在肿瘤的治疗方面虽然已经取得了长足的进步，但其治疗手段仍以化疗为主。目前化疗药物的毒副作用明显，所以新的抗肿瘤药物的开发问题急需解决。 新近的肿瘤治疗学说认为：肿瘤是应该发生凋亡的细胞群未发生凋亡的结果。细胞凋亡是发育过程中编程性的死亡过程，从这一角度看细胞凋亡可以看作是一种特殊形式的细胞分化。早期胚胎发育过程的细胞分化和细胞凋亡密切的联系着，考虑到早期发育的胚胎细胞内存在着能够诱发细胞分化和凋亡的因子，以及细胞凋亡在抗肿瘤药物机制中的重要作用，因而早期胚胎发育因子对细胞的诱导分化和凋亡，尤其是对肿瘤细胞的诱导凋亡及其在抗肿瘤方面应用的研究逐渐引起人们的关注。 本文旨在寻找诱导肿瘤细胞凋亡的新方法。本文利用早期胚胎发育因子(鸡胚和蛙胚)，主要是鸡胚的匀浆提取物，直接作用于体外培养的Hela细胞和HepG2细胞，利用形态学观察、流式细胞仪的检测等技术，了解早期胚胎发育因子对肿瘤细胞的分化、诱导凋亡的活性。形态学观察结果显示，胚胎提取物作用于Hela细胞和nepG2细胞后，能够抑制其生长，细胞出现回缩、变圆、脱落呈悬浮状，细胞微绒毛减少，染色体碎片状分解，生化膜空泡化，出现凋亡小体等典型的凋亡现象。流式检测结果显示，鸡胎提取物对Hela细胞具有明显的诱导凋亡作用，在浓度为12mg/ml时凋亡率可达70％。 本文的研究初步证实了早期胚胎提取物能够诱导肿瘤细胞发生凋亡，为进一步研究其机制奠定了基础。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一部分研究背景

一、肿瘤治疗的研究进展

二、化学药物治疗肿瘤的利弊

三、肿瘤与凋亡

四、肿瘤与胚胎发育

第二部分 胚胎匀浆提取物对肿瘤细胞凋亡的影响

一、材料

二、方法

第三部分结果与分析

一、形态学观察结果

（一）倒置显微镜观察结果

（二）荧光染色结果

（三）Wright氏染色结果

（四）电镜观察结果

二、流式细胞仪检测结果

第四部分讨论

一、鸡胚提取物对Hela和HepG2细胞的诱导凋亡作用

二、鸡胚提取物诱导凋亡作用的剂量依赖性

三、展望

第五部分结论

参考文献

致 谢