HBsAg/截短型HCV核心蛋白融合基因对番茄的遗传转化

摘要

本研究旨在探索乙肝病毒表面抗原/截短型 HCV 核心蛋白融合基因在植物中表达乙肝丙肝双价抗原的可能性，以期为进一步研制植物乙肝丙肝双价口服疫苗打下基础。 应用重组PCR技术将乙肝病毒(HBV)s基因连接在丙肝病毒(HCV)截短型核心蛋白序列的5’端，=者通过柔性肽(Gly<,4>Ser)<,2>序列相连，构建成融合基因BC，测序结果正确。 将融合基因 BC 克隆到植物双元表达载体pBin438上，获得DBin438BC，然后用冻融法将其转入根癌农杆菌EHA105中，侵染丽春番茄子叶和下胚轴，经预培养、共培养、脱菌培养、筛选培养、生根培养获得了 9 株抗卡那霉素的番茄植株。提取抗性植株基因组DNA，进行PCR及 PCR-Southern检测，5株获得阳性信号。初步表明目的基因已整合到了番茄基因组中。

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第一章前言

§1.1转基因植物口服疫苗的研究进展

§1.2乙型肝炎病毒疫苗的研究进展

§1.3丙型肝炎病毒疫苗的研究进展

§1.4本文研究目的和内容

第二章HBV S/HCV Core Protein融合基因的构建

§2.1材料和方法

§2.1.1实验材料

§2.1.2方法

§2.2结果

§2.3讨论

第三章融合基因植物表达载体的构建

§3.1材料和方法

§3.1.1实验材料

§3.1.2方法

§3.2结果

§3.3讨论

第四章番茄的遗传转化及转基因植株的鉴定

§4.1材料和方法

§4.1.1实验材料

§4.1.2方法

§4.2结果

§4.3讨论

结 论

参考文献

致 谢

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