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雄激素依赖及非依赖性前列腺癌细胞差异蛋白质组的初步研究

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论文说明:英文缩略语

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

实验技术路线图

前言

第一部分蛋白质分离—双向凝胶电泳技术

一、材料和方法

二、主要仪器设备

三、主要试剂

四、实验方法

五、实验结果

(一)细胞培养结果

(二)蛋白定量结果

(三)双向凝胶电泳技术建立及条件优化

(四)双向凝胶电泳图谱结果

(五)双向凝胶电泳图像分析结果

(六)双向凝胶电泳图谱数字化结果统计学分析

(七)2DE胶条上差异蛋白质的选取

讨论

小结

第二部分蛋白质鉴定—质谱分析及生物信息学

一、材料和方法

二、实验结果

讨论

小结

总结

参考文献

附录—综述:蛋白质组学在前列腺肿瘤研究中的应用

致谢

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摘要

本实验采用蛋白质组技术,对前列腺癌雄激素依赖性细胞株ALVA及雄激素非依赖性细胞株DU-145的总蛋白进行差异蛋白质组学研究,分别得出了该两种细胞的双向电泳图谱,找出了差异蛋白质点,进一步对差异蛋白质进行质谱分析,确定了4种蛋白质的性质。 建立前列腺癌雄激素依赖性细胞株ALVA及雄激素非依赖性细胞株DU-145总蛋白的双向凝胶电泳技术及条件优化;得出ALVA及DU-145两种细胞中总蛋白的双向凝胶电泳图谱,找出差异蛋白质点。应用PDQuest双向电泳图像分析软件对2DE图像进行数字化分析匹配与对比,并通过统计学处理评价双向凝胶电泳结果。在重复实验中进行实验方法的优化与改良。 成功建立了前列腺癌细胞株ALVA及DU-145的差异蛋白质组学研究方法;总结了前列腺癌雄激素依赖性细胞株ALVA及雄激素非依赖性细胞株DU-145总蛋白中确实存在差异蛋白质且分别与磷酸化、细胞糖代谢、细胞黏附及细胞分化有关,为进一步研究雄激素抵抗的机制提供了新思路的结论。

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