环氧化酶—2及血管内皮生长因子在慢性粒细胞性白血病中的表达特点和意义研究

摘要

血管增生是肿瘤发生发展中的重要特征。多种正性或负性调控因子参与肿瘤血管生成的调节，其中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是其中关键的正调节因子。两者不仅能促进血管内皮细胞分裂、增加肿瘤血管通透性，同时有促肿瘤细胞增殖，抗凋亡及加强肿瘤耐药等作用。 环氧化酶(cyclooxygenase，COX)是人体前列腺素(PGs)合成过程中重要的限速酶，有COX-1和COX-2两种异构体。COX-1在大多数细胞中呈稳定表达，维持机体正常的生理功能；而COX-2则在各种病理过程中特别是肿瘤发生发展过程中呈诱导性表达。有研究表明，多数实体瘤病理组织中，COX-2存在过度表达，其表达水平与肿瘤的发生、进展和预后关系密切。抑制COX-2表达能有效抑制肿瘤血管生成、诱导肿瘤细胞凋亡并增强肿瘤细胞对化疗药物的反应。 血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是生长因子家族中的一员。正常生理条件下，VEGF在机体组织中呈低水平表达，以旁分泌形式调节血管内皮细胞生长。恶性肿瘤细胞能大量合成并分泌VEGF，通过旁分泌方式促进肿瘤血管增生，通过自分泌方式刺激肿瘤细胞自身增殖、抑制细胞凋亡，在肿瘤的发生发展过程中发挥作用。VEGF在肿瘤中的表达受多种因素的调节，其中，COX-2能催化花生四烯酸产生代谢物PGE2正向调节VEGF的合成与分泌。在体外实验中，COX-2与VEGF的表达有明显的相关性。抑制COX-2的表达、降低PGE2水平或采用VEGF的特异性抑制剂均能有效降低VEGF的表达水平，减少内皮分裂、抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡并提高肿瘤细胞对药物的敏感性。 慢性粒细胞性白血病(chronic myeloid leukemia，CML)是一种造血干细胞恶性克隆性疾病。随着人们对CML发病机制的了解以及基因靶向药物--格列卫在CMI，治疗中的应用，CML的临床疗效已有了明显的改善，但远期效果仍不满意；对于进展和急变期慢粒患者，目前仍缺乏有力的治疗方案。因此，更加深入的揭示CML的发病机制，寻找有治疗意义的分子靶点，制定更加适合有效的治疗方案是当前迫切需要解决的问题。已有研究发现CML患者骨髓微血管密度异常增高，其白血病细胞中存在COX-2或。VEGF的异常表达，但对于COX-2或VEGF在CML临床病程中表达特点的研究仍然缺乏。此外，对于两者的异常表达在CML临床中的意义、以及在CML患者骨髓单个核细胞中共表达的相关性和作用机制，国内外鲜有研究报道。 本研究采用流式细胞仪技术、蛋白印迹(Western-Blot)、实时荧光定量PCR(Real time-PCR)及COX-2酶活性测定等方法从不同的角度观察了CML患者骨髓单个核细胞中COX-2的表达特点，分析COX-2的表达水平与CML患者多个临床参数之间的关系及其临床意义；定量测定血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及mRNA在CML患者骨髓单个核细胞中的表达，探讨其临床价值；研究VEGF与COX-2在CML患者骨髓单个核细胞中表达的相关性，并进一步探讨COX-2与VEGF在CML肿瘤发生发展过程中可能的相互作用机制。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分COX-2基因/蛋白/活性在CML患者骨髓单个核细胞中的表达分布特点及临床意义

1.1病例、材料和方法

1.2结果

1.3讨论

第二部分VEGF蛋白及mRNA在CML患者骨髓单个核细胞中的表达状态及意义

2.1病例、材料和方法

2.2结果

2.3讨论

第三部分COX-2与VEGF在CML骨髓单个核细胞中表达的相关性及临床意义

3.1病例、材料和方法

3.2结果

3.2讨论

小结

参考文献

环氧化酶-2(COX-2)在血液系统肿瘤中的研究进展

致谢

攻读学位期间主要的研究成果