沙鼠前脑缺血再灌注后脑组织HSP20和iNOS的表达及HSP20动脉血清浓度的研究

摘要

目的： 探讨在沙鼠短暂性前脑缺血再灌注模型中，HSP2O与iNOS在脑组织中表达的相关性及前者在动脉血清中的浓度变化，评估HSP20的神经保护作用及其临床应用前景。 方法： 通过夹闭双侧颈总动脉10分钟后再通的方法建立沙鼠前脑缺血再灌注模型：45只健康雄性蒙古沙鼠随机分为正常对照组(n=5)、假手术组(SO)(n=20)和缺血再灌注组(I/R)(n=20)，后两者分别分为6小时、1天、3天和7天四个亚组，每组5只，分别在缺血再灌注或假手术后各时间点收集动脉血血清后分批处死动物，快速取脑组织制作标本，采用HE染色观察海马CAl区病理改变；采用免疫组织化学染色方法分别检测前脑HSP20与iNOS的表达；采用ELESA法检测HSP20在动脉血血清中的浓度；全部数据用SPSS15.0进行统计分析。 结果： 1.HE染色：各缺血再灌注组中海马CA1区神经细胞均较正常组及假手术组减少；随着再灌注后时间延长，神经元坏死增多，并伴有不同程度的胶质细胞增生，这种改变以缺血再灌注后3天和7天最为明显。 2.免疫组化染色：正常对照组和各假手术组的脑组织无或仅见极少量的HSP20和iNOS阳性表达；缺血再灌注后二者的表达均随损伤时间延长而上调且于第3天达到高峰，第7天可见表达下降但仍高于正常组和假手术组(p＜0.05)，各时间点比较p＜0.05。运用直线相关性分析可知二者的表达呈正相关，其Pearson相关系数为0.884，P<0.05。 3.ELESA试验：正常组及各假手术组的沙鼠动脉血清中HSP20含量极低。脑缺血再灌注后6小时HSP20的含量迅速升高至最高峰，其浓度值自第1天开始下降，第3天及第7天继续降低但仍高于正常组和假手术组(p<0.05)，不同时间点比较p<0.05。 结论： 1.HSP20在缺血再灌注脑组织中表达上调。 2.HSP20可能通过影响iNOS而发挥神经保护作用。 3.首次在脑缺血再灌注个体的动脉血清中检测到HSP20并发现其浓度-时间变化规律。

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文摘

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论文说明：缩略词表

声明

前言

第一章材料和方法

1.1实验材料和仪器

1.2实验步骤和方法

1.3统计分析

第二章结果

2.1 HE染色结果

2.2免疫组化结果

2.3 ELESA结果

2.4图和表

第三章讨论

3.1 HSP20在脑缺血再灌注后神经细胞中表达的意义

3.2 iNOS在脑缺血再灌注后神经细胞中表达的意义

3.3 HSP20对iNOS表达的影响及机制

3.4 HSP20在脑缺血再灌注后血液循环中的作用

第四章结论

参考文献

综述　HSP20 and Nervous System Diseases

致谢