沙鼠前脑缺血再灌注后脑组织HSP20和EPO的表达变化及神经保护作用

摘要

目的:观察沙鼠前脑短暂性缺血再灌注后,HSP20与EPO在脑组织中的表达,探讨二者的相关性和保护机制,并评估它们的临床应用前景。
　　方法:(1)动物分组:将健康雄性蒙古沙鼠45只,随机分为三组:正常对照组(normal group)(n=5),假手术组(sham-operated group)(n=20)和脑缺血再灌注组(I/R group)(n=20)。其中假手术组和脑缺血再灌注组又分为四个亚组:六小时组(6h),一天组(1d),三天组(3d)和七天组(7d)。(2)模型制作:除了正常对照组之外其他动物都用3％戊巴比妥麻醉后做颈总动脉区皮肤切口,分离双侧颈总动脉。脑缺血再灌注组予以夹闭双侧颈总动脉十分钟后再恢复灌注血流。假手术组仅分离双侧颈总动脉不予夹闭。在对应的时间点断头处死各组动物。(3)HE染色观察沙鼠前脑组织的病理变化。(4)免疫组织化学染色观察HSP20和EPO的表达情况。(5)所有统计分析均用SPSS15.0统计软件包完成。
　　结果:(1)HE染色:正常对照组和各假手术组的沙鼠前脑组织形态结构没有明显的变化;脑缺血再灌注组根据时间点的不同可见胶质细胞肥大、增生,细胞和细胞间质水肿,神经元坏死。(2)免疫组化染色HSP20的表达:正常对照组和各假手术组的沙鼠前脑组织中偶有HSP20的表达。缺血再灌注损伤后HSP20的表达上调,于第三天达到高峰,后开始下降至七天时仍高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组比较p<0.05,不同时间点比较p<0.05)。(3)免疫组化染色EPO的表达:正常对照组和各假手术组的沙鼠前脑组织偶可见EPO的表达,在脑缺血再灌注后表达明显增高,于第三天达到高峰,后开始下降至七天时仍明显高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组比较p<0.05,不同时间点比较p<0.05)。(4)HSP20和EPO在沙鼠缺血再灌注前脑组织中的表达趋势相同呈正相关的关系,Pearson系数为0.777,p<0.05。
　　结论:(1)缺血再灌注的沙鼠脑组织中HSP20表达升高并有神经保护作用;(2)缺血再灌注的沙鼠脑组织中EPO表达升高并且通过不同的机制减轻缺血再灌注所导致的脑损伤;(3)缺血再灌注沙鼠脑组织中HSP20和EPO的表达呈正相关的关系。

目录

中文摘要

英文摘要

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 实验材料和仪器

2.2 实验步骤和方法

2.3 统计分析

第三章 结果

3.1 HE染色结果

3.2 免疫组化结果

第四章 讨论

4.1 HSP20在短暂性脑缺血前脑组织中的表达及神经保护作用

4.2 EPO在短暂性脑缺血前脑组织中的表达及神经保护作用

4.3 脑缺血再灌注损伤中Hsp20、EPO关系的探讨

第五章 结论

参考文献

综述

致谢