葡萄糖腹透液对单层人腹膜间皮细胞通透性的影响

摘要

超滤衰竭是目前腹膜透析(PD)患者退出治疗的最主要原因之一。大量研究证实，高浓度葡萄糖腹透液(PDS)的长期应用不但可造成的腹膜通透性升高，而且损伤后修复再生能力同样受到抑制，这种反复的损伤和修复异常将引起腹膜高滤过状态甚至细胞向间充质细胞转分化(EMT)的改变，最终导致超滤衰竭的发生。因此，研究PDS中葡萄糖成分在HPMC的高通透性改变和修复受抑过程中是否起着关键作用，对于透析超滤衰竭和腹膜纤维化的防治具有重要意义。但目前具体机制尚不明确。最新研究发现，间皮细胞单层融合状态下的跨细胞电阻值(Transmesothelial electrical resistance，TER)是反映间皮细胞层通透性的灵敏指标，这一技术为我们研究葡萄糖PDS对HPMC通透性的影响的问题提供了新的思路和方法。 目的： 观察不同浓度葡萄糖腹透液对单层HPMC增殖能力，通透性以及迁移修复能力的影响，研究葡萄糖成分是否是导致长期PD患者腹膜高通透性和超滤衰竭的重要因素，以探讨超滤衰竭和腹膜纤维化的发生发展机制。 方法： 体外培养HPMC，用不同浓度葡萄糖PDS(1.5％、2.5％、4.25％)分别与DMEM混合成1:1的实验干预液，另设单纯DMEM为对照组。作用各组细胞24小时后，四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖；采用双池培养皿构建人腹膜间皮细胞体外通透性模型，实验干预液分别作用于各实验组细胞0、3、6、12、24小时，采用TER技术测定葡萄糖对单层HPMC通透性的影响；实验干预液作用于各实验组24和48小时，采谓划痕损伤实验观察葡萄糖对HPMC细胞修复再生能力的影响。 结果： 葡萄糖腹透液干预HPMC24小时后，与对照组比较均可明显抑制HPMC的增殖(P<0.05)，且腹透液葡萄糖浓度越高，抑制越明显。HPMC的TER值随时间的延长而逐渐下降，且葡萄糖浓度越高，下降趋势越明显(P<0.005)。腹透液作用于各实验组24小时后，HPMC迁移修复能力与对照组相比明显受抑，且葡萄糖浓度越高，其抑制作用越明显。作用超过48小时后，2.5％和4.25％葡萄糖腹透液组细胞均出现细胞剥脱漂浮现象。 结论： 高糖腹透液不但导致HPMC增殖受抑，细胞通透性升高，而且还可抑制HPMC损伤后迁移修复能力。提示PDS中高糖成分是导致腹透患者腹膜高通透性和损伤后迁移修复受抑的发生的重要因素之一。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一章材料与方法

1.1材料

1.2实验方法

1.3统计学处理

第二章结果

第三章讨论

第四章结论

参考文献

综述 腹膜透析超滤衰竭的分子机制研究进展

致谢