川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型IL-10、IL-18表达的影响

摘要

目的：利用改良Allens打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型，观察损伤段脊髓组织中IL-10、IL-18的表达及川芎嗪干预对损伤段脊髓组织中IL-10、IL-18的表达影响。探讨川芎嗪对急性脊髓损伤的保护作用及可能机制。 材料和方法：正常成年SD大鼠88只，随机分成三组：(1)假手术组(S组，n=8)；(2)对照组(C组，n=40)；(3)实验组(T组，n=40)实验组和对照组大鼠按术后动物存活的时间再各分为1小时组，3小时组，6小时组，12小时组、24小时组、3天组、7天组和14天组，共八个亚组，每亚组5只大鼠。采用改良Allens重物打击法制作脊髓T10水平中度损伤模型80个。实验组(T组)大鼠伤后30分钟后开始予川芎嗪注射液经腹腔内注射200mg/kg，每天给药一次，存活时间少于5天者用药至死，多于5天者用药5天。对照组(C组)大鼠给予等量的生理盐水经腹腔内注射，给药次数和实验组相同。在造模后的相应时间点分别处死对应组大鼠取脊髓标本，每只大鼠取以损伤段为中心的长约1cm的脊髓组织。在每个脊髓标本纵轴中心横行切片，分别作IL-10和IL-18的免疫组化染色，观察各自的表达情况并计数。SPSS13.0统计分析软件对比各组动物的脊髓标本不同时间点IL-10和IL-18的表达是否有统计学差异。此外，24小时及超过24小时处死的大鼠在处死前作改良Rivilin斜板实验和BBB评分，以此评测脊髓运动神经功能，统计学分析两组间是否有差异。 结果：术后3小时脊髓前角IL-10表达阳性细胞计数开始升高，对照组和实验组均在术后3天达到高峰。术后24小时、3天和7天3个时间点上，IL-10表达数，实验组较对照组表达高，P＜0.05，有统计学意义。术后1小时脊髓前角IL-18表达阳性细胞计数即表达升高，术后24小时即达最高，；术后12小时，24小时、3天、7天和14天5个时间点上，实验组IL-18表达数低于对照组，P<0.05，有统计学意义。 改良Rivlin斜板实验，术后斜板临界度数均值逐渐升高，实验组较对照组斜板临界度数高，术后7天及14天时，两组间斜板临界度数比较t检验P<0.05，有统计学差异。 BBB评分，术后BBB评分均值逐渐升高，实验组较对照组评分值高，术后7天和14天时，实验组和对照组有统计学差异(P<0.05)。 结论：川芎嗪对大鼠脊髓继发性损伤有保护作用：川芎嗪能够促进大鼠急性脊髓损伤后IL-10的表达、抑制IL-18的表达。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

第二章材料和方法

2.1主要设备和试剂

2.2大鼠分组和饲养

2.3大鼠急性脊髓损伤模型的制作

2.4大鼠的给药

2.5脊髓功能的行为学评分

2.6大鼠脊髓标本的收取

2.7大鼠脊髓组织蜡块切片

2.8 ABC(亲和素-生物素酶复合物)染色法检测IL-10和IL-18（按厂家的试验操作流程和标准进行）

第三章结果

3.1行为学评分

3.2 HE染色病理改变

3.3白细胞介素的表达

第四章讨论

4.1脊髓损伤模型的选择

4.2大鼠的给药

4.3行为学评分

4.4白细胞介素与脊髓损伤

4.5川芎嗪与脊髓损伤

4.6展望

第五章结论

参考文献

综述脊髓继发性损伤后细胞因子的表达

致谢