HaCaT细胞共培养法诱导兔骨髓间充质干细胞表达角蛋白的研究

摘要

目的： 探讨在体外培养的条件下HaCaT细胞诱导兔骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells，MSCs)表达角蛋白的可能性。 方法： 1.抽取健康大白兔骨髓，以密度梯度法分离纯化MSCs。培养扩增后，应用流式细胞仪检测CD34，CD44，CD45鉴定细胞。 2.取第3代MSCs与HaCaT细胞以105:102个/ml种入培养瓶共培养，分别于3，7天，以胰酶差速消化分离MSCs和HaCaT，用免疫细胞法检测角蛋白(Pan-cytokeratin，CK19)的表达。 结果： 1.原代培养的骨髓间充质干细胞在体外扩增后，流式细胞术检测结果显示CD34、CD45阴性，CD44阳性。 2.共培养3天、7天后分别行免疫细胞化学检测，结果显示Pan-CK和CK19均为阳性。共培养3天的MSCs Pan-CK阳性率(13.5±3.7％)显著低于共培养7天的MSCs(29.1±8.3％)，共培养3天的MSCs CK19阳性率(3.1±0.5％)与共培养7天的MSCs(3.3±0.8％)相比没有显著差异。 结论： 通过与HaCaT细胞共培养兔骨髓间充质干细胞可表达角蛋白，并可能被诱导分化为表皮细胞或表皮干细胞。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

第一部分

第二部分共培养法诱导MSCs表达角蛋白的研究

第一章 材料和方法

第二章 结果

第三章 讨论

结论

参考文献

综述：组织工程化皮肤的现状及展望

致谢

攻读硕士学位期间参与的课题