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AG490对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡及Bcl-2表达的影响

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论文说明:缩略语表

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第一章前言

第二章材料与方法

第三章结果

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述:JAK/STAT通路阻断剂AG490的研究现状

致谢

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摘要

目的:观察JAK激酶抑制剂AG490对人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖、凋亡及Bc1-2表达的影响。 方法: (1)培养人宫颈癌细胞系Hela细胞并在光学显微镜下观察活细胞生长情况并摄片。 (2)Hela细胞在含有10 μmol/l、20 μmol/l、40 μ mol/l、80 μmol/l的AG490中培养24h、48h、72h,应用光学显微镜动态观察细胞形态学变化。 (3)通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察AG490对细胞增殖活力的影响,计算细胞生长抑制率和IC50。 (4)采用流式细胞仪(FCM)定量检测终浓度为20 μmol/l、40 μ mol/l、80 μ mol/l的AG490作用Hela细胞48h后不同浓度组细胞的凋亡率,并分析AG490对细胞周期分布的影响。 (5)采用终浓度为20 μmol/l、40 μmol/l、80 μmol/l的AG490处理Hela48h,之后应用免疫细胞化学染色技术观察Hela细胞的凋亡相关基因Bcl-2表达的变化。各实验对照组均加入同等浓度的DMSO,未加入其他干预因素。 结果: (1)AG490以时间-剂量依赖性方式显著地抑制人宫颈癌细胞系Hela细胞体外的增殖活性。 (2)经终浓度分别为10 μmol/l、20 μmol/l、40 μmol/lAG490处理Hela细胞36h后,细胞被阻滞于G1期,S期细胞比例(SFP)明显降低。AG490作用24小时后,细胞bcl-2蛋白的表达降低,并出现典型的细胞凋亡的形态学表现,作用时间到48小时,Hela细胞凋亡达高峰。 结论: 1.JAK激酶抑制剂AG490能有效抑制人宫颈癌Hela细胞的体外增殖,其作用呈时间一量效关系。 2.AG490下调Bcl-2蛋白表达,促进Hela细胞凋亡,凋亡率呈浓度依赖性。

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