BMP-2反义寡核苷酸对皮肤疤痕组织中成纤维细胞生长及胶原合成的影响

摘要

背景：瘢痕曾被认为是人类创伤愈合的必然产物，随着烧伤治愈率的提高，深度烧伤创面愈合后瘢痕遗留问题日益成为烧伤整形治疗的主要难题。瘢痕的基本病理学改变是细胞外基质大量堆积，主要是胶原蛋白的无序堆积和比例失衡，成纤维细胞是胶原合成和分泌的主要功能细胞，成纤维细胞的生长增殖、胶原合成活动与瘢痕形成密切相关。 胎儿创面无瘢痕愈合现象的发现，提示人类创伤也可无瘢痕愈合，有学者发现这一现象与骨形态蛋白(BMPs)相关。 BMPs是转化生长因子-β(TGF-p)超家族的成员，最初因其诱导成骨的作用引起人们重视，随着研究的深入，人们发现它是一个多功能因子，在胚胎发生和发育、组织与细胞的分化和增殖等方面起重要作用。BMP-2是BMPs中最活跃的细胞因子之一，与成纤维细胞关系密切，以往研究多集中于骨、关节周围的成纤维细胞，皮肤及瘢痕成纤维细胞尚无深入研究的报道。 Stelnicki EJ等研究表明在胎儿皮肤组织里BMP-2低水平表达，而加入外源性BMP-2作用下胎儿创面像成人一样愈合后留有瘢痕，提示BMP-2参与瘢痕形成。实验中Stelnicki EJ发现BMP-2在表皮细胞和成纤维细胞均有表达。BMP-2在成人瘢痕组织中的表达如何?BMP-2在人类瘢痕成纤维细胞内的表达与正常皮肤有无区别?它对瘢痕形成的主要功能细胞-成纤维细胞的增殖、生长及胶原合成功能有无影响?国内外目前还无相关报道，因此我们设计此实验，通过Western blot、RT-PCR等方法检测BMP-2在正常皮肤组织中、成纤维细胞内的表达；并通过寡义核苷酸干扰BMP-2的表达，观察其对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。 目的：检测BMP-2在正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩组织中的表达。 方法：收集54份成人标本，其中正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩各18份，切片，免疫组化染色，观察各组织块内BMP-2的表达，统计分析采用F检验，两组间采用方差分析的两两比较(LSD法)。 结果： 1、BMP-2在正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩组织中有表达，在表皮细胞、成纤维细胞均有表达。 2、BMP-2在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中表达较正常皮肤明显增强，三组标本中BMP免疫染色计分的均数差别有统计学意义，瘢痕疙瘩组与正常皮肤组、增生性瘢痕组与正常皮肤组BMP免疫染色计分的均数差别有统计学意义，但瘢痕疙瘩组与增生性瘢痕组的BMP免疫染色计分的均数差别无统计学意义。 结论：BMP-2在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达较在正常皮肤中明显高。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：本文主要英汉缩略语名词对照表

声明

技术路线

第一章皮肤、瘢痕及瘢痕疙瘩组织中BMP-2的表达

1引言

2实验材料

3实验方法

4实验结果

5讨论

6结论：

第二章皮肤及瘢痕成纤维细胞内BMP-2的表达

1引言

2实验材料

3实验方法

4实验结果

5讨论

6结论

第三章BMP-2反义寡核苷酸对增生性瘢痕组织中成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

1引言

2实验材料

3实验方法

4实验结果

5讨论

6结论

总结论

参考文献

综述一 疤痕的研究概况

综述二 BMPs的研究新进展

致谢

攻读博士学位期间发表的论文、承担的课题及获奖情况