氧化应激在糖尿病肾病鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用及普罗布考干预研究

摘要

背景：糖尿病肾病是糖尿病重要的微血管并发症，是导致终末期肾病最主要的原因，目前研究表明氧化应激和肾小管上皮细胞转分化及核转录因子Sp1在其发病机制中占有重要地位，但氧化应激和转分化及核转录因子Sp1在糖尿病肾病中的相互作用机制仍不清楚。 目的：研究糖尿病大鼠氧化应激与肾小管上皮细胞转分化及核转录因子Sp1之间的关系；探讨普罗布考对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制。 方法：30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（CN），糖尿病肾病模型组（DN）和普罗布考+DN干预组（PN），每组10只，糖尿病成模次日，普罗布考组大鼠予1％普罗布考饮食干预12周；3周后检测各组大鼠尿蛋白（UAlb），24小时UAlb>30mg，DN模型成立。第8周及第12周分别收集24h尿液，检测尿24小时UAlb，12周后处死大鼠，检测大鼠血清生化及肾脏组织匀浆氧化应激指标；观察大鼠肾脏组织病理学变化及免疫组化检测特异性蛋白1（Sp1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达；Westernblot检测肾组织α-SMA及E-cadherin蛋白表达。 结果：与对照组比较，DN组血糖、SCr和Ualb显著增高（P<0.01），CCr显著降低（P<0.01）；肾组织匀浆MDA明显高于CN组及PN组（P<0.001）；肾脏病理学显示肾组织肾小管损伤分数、明显高于PN组及CN组（P<0.001）；肾组织α-SMA主要表达于动脉壁及肾小管上皮细胞胞膜和胞浆，E-cadherin表达于肾小管上皮细胞胞膜和胞浆，Sp1主要表达于肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞核。DN组α-SMA和Sp1蛋白表达明显高于PN组及CN组（P<0.001），E-cadherin蛋白表达明显低于PN组及CN组，各组大鼠肾组织MDA含量与α-SMA及Sp1蛋白表达呈正相关（γ=0.862，P<0.001；γ=0.896，P<0.001），与E-cadherin蛋白表达呈负相关（γ=-0.673，P<0.001）。普罗布考预防组SCr、Ualb、肾组织MDA、肾小管损伤分数、肾组织α-SMA、 Sp1蛋白表达较DN组明显降低，CCr及E-cadherin蛋白表达较DN组明显增加（P<0.001），且与正常组相比差异无统计学意义。 结论：STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肾组织氧化应激水平增高；氧化应激在DN鼠肾小管上皮细胞转分化的早期起重要作用；Sp1在氧化应激介导的DN鼠肾小管上皮细胞转分化中可能起一定作用；普罗布考对糖尿病肾病起一定的保护作用，其机制可能与其抗氧化，抑制肾组织Sp1的活化和肾小管上皮细胞转分化有一定关系。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词

声明

第一章 前言

第二章 材料和方法

1.材料

2.方法

第三章 结果

3.1各组大鼠血清生化指标的变化

3.2各组大鼠体重及24 h尿蛋白排泄率的变化

3.3各组大鼠肾组织匀浆氧化应激指标的变化

3.4各组大鼠肾组织病理学检查

3.5各组大鼠免疫组化检查

3.6各组大鼠肾皮质MDA含量和肾小管损伤、肾组织转分化指标相关分析

3.7Western blot检测各组大鼠肾组织α-SMA和E-cadherin血蛋白质表达

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

附图

综述 氧化应激与慢性肾脏疾病

致谢

攻读学位期间发表的论文