耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型及分子流行病学研究

摘要

目的:探讨医院和社区感染的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）SCCmec基因型分子流行病学特征；探讨杀白细胞毒素（PVL）与MRSA感染疾病严重程度的关系，并对MRSA菌株多位点序列分型（MLST）进行研究。 方法:应用头孢西丁纸片扩散法对MRSA菌株进行初筛；应用聚合酶链反应（PCR）对MRSA进行mecA基因确认；应用多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型；应用琼脂稀释法对MRSA菌株进行抗生素最小抑菌浓度（MIC）检测；应用PCR扩增检测PVL基因；应用PCR对PVL阳性菌株进行MLST分型。 结果:110株金黄色葡萄球菌中头孢西丁初筛阳性85株，经mecA基因确认的MRSA为64株；64株MRSA中SCCmecⅢ型占89.0％（57/64），SCCmecⅡ型占1.6％（1/64），SCCmecⅣ型占1.6％（1/64），未分型MRSA占7.8070（5/64），未发现SCCmecⅠ、Ⅴ型菌株；64株MRSA中63株为HA-MRSA菌株，PVL基因均为阴性，对多种抗生素耐药率较高，对氯霉素、复方新诺明敏感率较高，所有菌株均对万古霉素敏感；1株为CA-MRSA菌株，其PVL基因阳性，MLST分型为ST59，除了对β-内酰胺类抗生素耐药以外，只对林可酰胺类、大环内酯类、四环素类药物耐药。 结论:医院感染MRSA主要以SCCmecⅢ型流行株为主；本地区发现社区感染MRSA为ST59-SCCmecⅣ型，携带PVL毒力基因；医院感染MRSA对抗生素呈多重耐药性，社区感染MRSA菌株耐药谱比医院感染MRSA菌株耐药谱窄，加强对MRSA的监测对指导临床合理使用抗生素具有重要意义。

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论文说明：缩略词表

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第一章 前言

第二章材料和方法

2.1材料

2.1.1菌株来源

2.1.2标准菌株

2.1.3主要试剂

2.1.4主要仪器

2.2方法

2.2.1金黄色葡萄球菌分离培养及鉴定

2.2.2细菌基因组DNA模板提取

2.2.3 MRSA菌株鉴定

2.2.4抗菌药物MIC试验

2.2.5 SCCmec基因分型多重PCR扩增

2.2.6 PVL基因扩增

2.2.7 MLST分型

2.2.8琼脂糖凝胶电泳

第三章 结果

3.1金黄色葡萄球菌及MRSA分离结果

3.2 SCCmec基因分型多重PCR扩增结果

3.3 PVL基因扩增结果

3.4 MLST分型结果

3.5 MRSA抗菌药物敏感性试验结果

第四章 讨论

4.1金黄色葡萄球菌及MRSA分离结果讨论

4.2 SCCmec基因分型结果分析与讨论

4.3 PVL基因扩增结果讨论

4.4 MLST分型结果讨论

4.5 MRSA抗菌药物敏感性试验结果分析与讨论

第五章结论

参考文献

综述:社区感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

致谢

攻读学位期间主要的研究成果