RUNX3基因启动子甲基化与术后非小细胞肺癌预后的研究

摘要

目的：检测80例术后接受顺铂辅助化疗非小细胞肺癌石蜡包埋肺癌组织的RUNX3基因启动子甲基化状态，并分析RUNX3基因启动子甲基化与临床病理特征、术后非小细胞肺癌无病生存及总生存的关系，以指导临床术后辅助治疗。 方法：收集80例术后接受顺铂辅助化疗非小细胞肺癌患者的甲醛固定石蜡包埋肺癌组织标本，蛋白酶K消化-酚/氯仿法提取DNA，应用巢氏甲基化特异性PCR（nMSP）检测RUNX3启动子甲基化状态，并随访80例患者的术后复发转移和生存状况。应用统计软件X2检验分析甲基化状态与年龄、性别、吸烟史、病理类型、胸膜侵犯、TMN分期等临床病理特征的关系，Logistic回归分析方法分析影响术后无病生存的因素，单因素Kaplan-Meiker分析（Log-rank检验）甲基化状态与总生存的关系，COX多因素分析影响总预后的因素。 结果： 1、80例NSCLC肿瘤样本中20例检测到了RUNX3基因启动子甲基化（25.0％）。 2、RUNX3启动子基因甲基化与病理类型相关（P=0.020），腺癌（16/4436％）明显高于鳞癌（4/3611％），RUNX3基因启动子甲基化与三年复发转移正相关（P=0.006），与三年是否死亡相关（P=0.019）。RUNX3甲基化状态与年龄、性别、吸烟史、病理分化程度、胸膜侵犯、TMN分期、N分期无明显相关性。 3、Logistic回归分析表明N分期（OR：4.898P=0.000）、RUNX3基因启动子甲基化（OR：20.293 P=0.011）是影响术后无病生存的独立危险因素。 4、单因素K-M生存分析表明RUNX3基因甲基化组较未甲基化组总生存率低（P=0.003 log-rank检验），COX多因素分析表明N分期（RR：2.393，95％CI：1.518=3.77 P=0.000）、RUNX3基因甲基化（RR：2.345，95％CI：1.130-4.865 P=0.022）是影响总生存的独立危险因素。 结论：RUNX3基因启动子甲基化是非小细胞肺癌中一种常见的表观遗传修饰，可能在肺癌发生发展中有重要的作用。RUNX3基因甲基化与病理类型相关，腺癌明显高于鳞癌。RUNX3基因未甲基化组生存率较甲基化组高，总生存时间亦较甲基化组长。RUNX3基因甲基化、N分期是影响术后NSCLC无病生存和总生存的独立影响因素，RUNX3基因启动子甲基化可望成为新的NSCLC预后生物标记。

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第一章前言

第二章材料与方法

2.1临床病理资料和标本来源

2.2主要试剂和耗材

2.3主要仪器设备

2.4部分溶液配制

2.5引物合成

2.6试验方法

2.7统计学方法

第三章结果

3.1石蜡组织中提取的DNA质量检测

3.2巢式MSP法检测RUNX3基因启动子甲基化

3.3随访结果

3.4 RUNX3基因启动子甲基化与肺癌临床病理特征的关系

3.5 RUNX3基因启动子甲基化与NSCLC复发转移的多因素分析

3.6 RUNX3基因启动子甲基化与NSCLC总体生存的单因素分析和多因素分析

第四章讨论

第五章结论

参考文献

综述：DNA甲基化与非小细胞肺癌预后的关系最新进展

致谢