2型糖尿病患者血浆VLCPUFA水平变化及其与NF-κB基因多态性的关系

摘要

目的:肥胖和胰岛素抵抗(IR)易导致2型糖尿病,其机制与炎症反应密切相关。研究发现2型糖尿病患者存在脂肪酸代谢紊乱,而增加超长链多不饱和脂肪酸(VLCPUFA)的摄入可抑制炎症反应,改善肥胖和IR。本研究以炎症反应通路中核转录因子-κB(NF-κB)为目的基因,检测其基因非编码区的(CA)短串联重复序列长度多态性在中国汉族肥胖和非肥胖2型糖尿病患者中的表达,并检测VLCPUFA水平和相关临床指标,了解2型糖尿病患者血浆VLCPUFA水平的变化及其与NF-κB基因多态性与的关系,为临床寻找更有效的诊治和预防2型糖尿病的方法提供参考。
　　 方法:从湘雅医院内分泌门诊病人中随机选择2型糖尿病患者241例(肥胖组173例,非肥胖组68例),同时选择年龄、性别相匹配的正常体重人群165例为健康对照组。采用全自动生化分析法检测甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)；免疫透射比浊法测C反应蛋白(CRP)；高效液相色谱法检测糖化血红蛋白(GHbA1C)；葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FBG)及100克馒头餐后30、120分钟血糖(PBG30、PBG120)；放射免疫法检测血空腹胰岛素水平(FINS)及100馒头餐后30、120分钟胰岛素水平(PINS30、PINS120),并计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),稳态模型胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)和早期胰岛素分泌指数[△I30/△G30=(PINS30-FINS)/(PBG30-FPG)]；气相色谱/质谱(GC/MS)法测血浆超长链n-3PUFAs、n-6PUFAs及总VLCPUFA水平；聚合酶链式反应(PCR)扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法检测NF-κB基因非编码区的(CA)短串联重复序列长度多态性,随机选择部分样品应用直接测序法验证PCR-PAGE结果。应用独立样本t检验、卡方检验、F检验、直线相关分析和多元逐步同归分析进行统计学处理。
　　 结果:①与健康对照组相比,2型糖尿病组BMI、WHR、GHbA1C、FPG、PBG30、PBG120、FINS、HOMA-IR、TG、TC和CRP的水平增高,PINS30和△I30/△G30降低(P<0.05)；2型糖尿病组中,与非肥胖组相比,肥胖组PBG30、FINS、PINS120、HOMA-IR、TG和TC水平增高,PINS30和△I30/△G30降低(P<0.05)。②与健康对照组相比,2型糖尿病组血浆n-6PUFAs、n-3PUFAs、n-6/n-3脂肪酸比值及总VLCPUFA水平降低(P<0.05)。直线相关分析显示血浆总VLCPUFA水平与BMI、WHR和HOMA-IR呈负相关,与TG、TC、HDL-C、LDL-C和FINS呈正相关(P<0.05)。多元逐步回归分析影响血浆VLCPUFA的因素依次为HOMA-IR和BMI。③NF-κ3基因共检测出13种CA等位基因片段(118bp-142bp),等位基因132bp的分布在2型糖尿病非肥胖组(9.56％)和健康对照组(6.36％)高于2型糖尿病肥胖组(1.73％)；等位基因134bp分布在2型糖尿病肥胖组(36.13％)高于2型糖尿病非肥胖组(27.21％)和健康对照组(28.48％),均有统计学意义(P<0.05)。④携带134bp等位基因者发生2型糖尿病肥胖的相对危险率为2.34(P<0.05)。⑤与未携带134bp等位基因组(非A9组)相比,携带134bp等位基因组(A9组)BMI、FPG、PBG30、PBG120、GHbA1C、CRP水平明显增高(P<0.05)；PINS30、PINS120、HOMA-β、△I30/△G30降低(P<0.05)；血浆n-6PUFAs、n-6/n-3脂肪酸比值和总VLCPUFA水平降低(P<0.05)。
　　 结论:①2型糖尿病患者血浆VLCPUFA代谢紊乱,表现为n-6PUFAs、n-3PUFAs、n-6/n-3脂肪酸比值及总VLCPUFA水平降低。②2型糖尿病患者血浆VLCPUFA水平与BMI和HOMA-IR呈负相关。③在中国湖南汉族超重或肥胖的2型糖尿病患者NF-κB132bp等位基因分布频率降低；134bp等位基因分布频率增高,并与BMI呈正相关。④携带NF-κB134bp等位基因的2型糖尿病患者血糖、BMI和CRP水平明显升高,血浆VLCPUFA水平、β细胞功能指数和早期胰岛素分泌指数明显降低。