前列腺液实验室检查在慢性前列腺炎病原学中的研究

摘要

目的:
　　 通过前列腺液常规中白细胞的检查、细菌涂片的检查、前列腺液细菌培养及药敏分析、前列腺液中细菌16SrDNA基因的检测,探讨前列腺液病原微生物与慢性前列腺炎的关系,以期进一步指导慢性前列腺炎的临床诊断和治疗。
　　 方法:
　　 (1)观察218例标本中白细胞的半定量计数的情况,比较WBC≥10个/视野和WBC＜10个/视野二种情况时,培养法和PCR法中细菌的检出率,及支原体、衣原体的检出率;将WBC≥10个/视野的前列腺液标本用瑞氏染液染色后,在油镜下进行白细胞分类计数,探讨不同类型的慢性前列腺炎患者的白细胞分类是否不同;将前列腺液标本用革兰氏染液染色后,在油镜下查找是否有细菌感染,同时与培养法和PCR法比较阳性率。
　　 (2)将前列腺液进行细菌培养和支原体、衣原体培养,同时做药敏试验。普通培养采用血琼脂平皿、沙氏培养皿、L型培养皿;支原体采用解脲人型双向选择培养基,沙眼衣原体采用胶体金法。
　　 (3)采用PCR法检测前列腺液中细菌16SrDNA基因,结果与培养法检测结果进行比较。
　　 结果:
　　 (1)采用常规方法检查白细胞,发现在细菌培养和PCR二种鉴定方法中,WBC＜10个/视野和WBC≥10个/视野的结果没有显著性差异。由细菌感染引起的白细胞升高,以中性粒细胞的升高为主。直接用前列腺液做细菌涂片中发现,细菌涂片的阳性率低于细菌培养法和PCR法。但适合于门诊患者和急需拿到检验结果的患者。
　　 (2)218例前列腺炎患者普通培养中单一菌感染122例,混合感染1例;L型培养中与普通培养共同阳性且为同一种菌者76例,单纯L型培养阳性者3例;支原体、衣原体培养阳性46例。凝固酶阴性葡萄球菌对万古霉素的敏感性中出现了1例中敏,仅万古霉素、利福平、庆大霉素、克林霉素、复方新诺明等5种药物的敏感性较高:金黄色葡萄球菌对利福平、庆大霉素、氯霉素、强力霉素敏感性较高;大肠埃希氏菌中对阿米卡星、磷霉素、美洛培南、哌拉西林、头孢类(包括头孢哌酮、头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋肟)、喹诺酮类(包括环丙沙星、左氟沙星)、呋喃妥因等敏感性较高。
　　 (3)聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术检测慢性前列腺炎患者前列腺液中细菌16SrDNA基因,218例标本中细菌培养阳性124例,这124例培养阳性标本PCR法全部为阳性,均为细菌性前列腺炎;在培养法阴性的93例标本中,PCR法阳性率84.9％。细菌培养法与PCR法检测结果比较PCR法的阳性率高于培养法。
　　 结论:
　　 (1)Ⅱ型前列腺炎患者的白细胞并不一定都出现升高,出现前列腺炎症状即使白细胞处于正常也建议做病原学检查,以免被误诊为ⅢB型前列腺炎。
　　 (2)细菌性前列腺炎患者如出现白细胞升高,则以中性粒细胞升高为主。
　　 (3)细菌涂片适用于门诊病人和急需做出诊断的患者。
　　 (4)细菌感染是引起前列腺炎的主要原因之一,革兰氏阴性菌以大肠埃希氏菌、克雷伯菌为主,革兰氏阳性菌以金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性的葡萄球菌为主。支原体、衣原体的感染也是引起前列腺炎的主要原因之一。
　　 (5)16SrDNA基因的检测可提高细菌性前列腺炎的诊断率。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:中英文缩略语对照

第一章 前言

第二章 材料和方法

2.1 材料和设备

2.1.1 质控菌株

2.1.2 试剂

2.1.3 仪器与设备

2.1.4 实验用主要抗生素

2.1.5 16SrDNA基因测定的引物

2.2 方法

2.2.1 临床病例

2.2.2 标本采集

2.2.3 前列腺液的白细胞检查和细菌涂片检查

2.2.4 细菌培养

2.2.5 药敏试验

2.2.6 前列腺液中16SrDNA基因的检测

2.2.7 统计学方法

第三章 结果

3.1 前列腺液的白细胞检查和细菌涂片检查结果

3.1.1 白细胞的半定量计数结果

3.1.2 白细胞的分类计数结果

3.1.3 细菌涂片结果

3.2 前列腺液病原学检测结果

3.2.1 普通细菌培养结果

3.2.2 L型细菌培养结果

3.2.3 真菌培养结果

3.2.4 支原体、衣原体培养结果

3.3 药敏结果

3.3.1 细菌培养药敏的结果

3.3.2 支原体药敏结果

3.4 前列腺液中16SrDNA基因的检测结果

3.4.1 扩增产物分析

3.4.2 PCR法与培养法的比较

第三章 讨论

3.1 病原微生物的检测及药敏实验

3.1.1 病原菌的构成

3.1.2 抗菌药物的敏感性

3.2 前列腺液中16SrDNA基因的检测对慢性前列腺炎诊断的意义

3.3 细菌涂片的临床实用性

3.4 白细胞与慢性前列腺炎

第四章 结论

参考文献

综述:前列腺炎的病因学及实验室检查

致谢

攻读硕士期间主要研究成果