枳椇子水提取液对乙醇体外诱导脂肪变性L-02细胞Adipor2基因表达的影响

摘要

目的：
　　 观察不同浓度乙醇体外诱导的脂肪变性L-02细胞脂联素受体2基因的表达，探讨枳棋子对酒精性肝病的防治作用及枳棋子调节脂肪变性肝细胞脂质代谢的机制。
　　 方法：
　　 MTT法筛选出最佳乙醇浓度范围，在不同浓度乙醇作用于人肝L-02细胞24小时后即加入最适宜浓度枳椇子(HDT)水提取液，同时继续干预48小时，观察不同浓度乙醇组L-02肝细胞的油红O染色结果，细胞内甘油三酯的含量及培养液中ALT、AST泄漏量，RT-PCR检测各组细胞脂联素受体2mRNA(Adipor2mRNA)的表达。
　　 结果：
　　 1.油红O染色结果发现：正常组细胞形态正常，胞膜界限清楚，无明显脂滴形成；随乙醇浓度的增加，细胞肿胀越明显，脱壁细胞增多，贴壁细胞内橘红色脂滴逐渐增多，脂滴内颗粒越大，有的细胞甚至出现胞膜破裂。
　　 2.与正常组比较，各浓度乙醇组细胞内的TG含量均比正常组增高；经枳椇子干预后，各组细胞内TG含量均较前减少。
　　 3.与正常组比较，0.3％乙醇组对AST、ALT泄漏量的影响差异无统计学意义(P>0.05)；其余各组间均有明显差别(P<0.05)，且随乙醇浓度增高，AST、ALT泄漏量增大；枳椇子水提取液除对正常组细胞干预前后AST、ALT泄漏量差异无统计学意义(P>0.05)外，对其余各组经乙醇干预细胞均有明显的差异，可明显减少AST、ALT泄漏量(P<0.05)。
　　 4.与正常组相比，除0.3％乙醇组Adipor2mRNA表达量升高(P>0.05)外，其余各组细胞Adipor2mRNA表达量均比正常组降低(P<0.05)；枳椇子干预后除正常组及2.4％乙醇组Adipor2mRNA的表达与干预前差异无统计学意义外(P>0.05)，其余各乙醇组细胞Adipor2mRNA的表达均较干预前明显增加(P<0.05)。
　　 结论：
　　 1.采用不同浓度的乙醇作用于人L-02肝细胞，使其发生不同程度的脂肪变性，可成功地建立酒精性脂肪肝体外细胞模型。
　　 2.人L-02肝细胞Adipor2mRNA的表达随着乙醇作用浓度的增高而下调，且与肝细胞的脂肪变性程度密切相关。
　　 3.枳椇子水提取液干预后肝细胞脂肪变性程度减轻，Adipor2mRNA的表达增高，因此推测Adipor2mRNA的表达上调是枳椇子水提取液减轻乙醇所引起的肝细胞脂肪变性的机制之一。