垂体腺瘤干细胞的分离鉴定

摘要

目的:探讨垂体腺瘤存在肿瘤干细胞，具备自我更新和多向分化潜能，表达干细胞标志物，是垂体腺瘤的启动细胞。
　　 方法:收集多种类型的垂体腺瘤患者术后的垂体腺瘤标本，1.通过组织分离原代细胞，单克隆增殖实验观察其成球能力与自我更新。2.免疫荧光的方法进行鉴定肿瘤干细胞及分化细胞特异性分子标志物的表达。3.Western-blot实验验证垂体腺瘤干细胞及分化肿瘤细胞株的蛋白表达。4.通过诱导分化验证垂体腺瘤干细胞的多分化潜能。
　　 结果:1.通过组织分离可得到垂体腺瘤的原代细胞，在加入B27、bFGF、EGF等因子的无血清培养基中少数细胞可以自我更新增殖，逐步形成悬浮生长的细胞球;在96孔板中可以单细胞克隆增殖，并通过卡方检验分析，PRL瘤、GH瘤和无功能腺瘤干细胞自我更新能力无明显差异。2.免疫荧光鉴定垂体腺瘤原代细胞球Nestin、CD133、SOX2等干细胞标志物表达阳性而分化培养的细胞则不上述干细胞标志物，而是表达特定分化肿瘤的相关抗原β-tubulin、GFAP、PRL、GH、ACTH。3.Western-blot实验中证实无血清培养的原代细胞表达干细胞标志物，而分化的细胞和垂体瘤细胞株干细胞的标志物表达阴性。4.在加入促激素释放因子的含血清的培养基中可形成特定的GH、PRL、ACTH终末分化细胞
　　 结论:1.垂体腺瘤作为一种良性肿瘤，同恶性肿瘤一样存在肿瘤干细胞;2.垂体腺瘤干细胞具备肿瘤干细胞特性，垂体腺瘤干细胞表达肿瘤干细胞标志物，在体外细胞培养中可以自我更新，并有多向分化潜能。

目录

声明

摘要

英文缩写一览表

第一章 前言

第二章 对象与方法

1．1 研究对象

1．2 研究方法

2 统计学分析

第三章 结果

3．1 病理结果

3．2 垂体瘤干细胞(pituitary adenoma stem cells)具有成球能力

3．3 垂体瘤干细胞球具有自我更新能力

3．4 垂体干细胞球表达多种干细胞标志物

3．5 Western-blot进一步验证垂体腺瘤干细胞球、分化细胞、肿瘤细胞株蛋白表达

3．6 垂体腺瘤干细胞细胞具有多向分化能力

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢