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【6h】

酰基化ghrelin对棕榈酸诱导的THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路活化的作用

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摘要

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第一章 前言

第二章 材料与方法

1.1 实验材料

2.1 实验方法

3.统计学分析

第三章 结果

1.棕榈酸对THP-1巨噬细胞TLR4、NF-κB p65磷酸化蛋白以及分泌TNF-α、IL-1β的影响

2.酰基化ghrelin对棕榈酸孵育的THP-1巨噬细胞TLR4、NF-κB p65磷酸化蛋白以及分泌TNF-α、IL-1β的影响

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢

攻读学位期间主要的研究成果

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摘要

目的:探讨酰基化ghrelin对棕榈酸诱导的人源单核巨噬细胞(THP-1巨噬细胞)TLR4/NF-κB信号通路的作用。
   方法:用不同浓度的棕榈酸(100μmol/L、200μmol/L、500μmol/L)孵育THP-1巨噬细胞株12h;用不同浓度的酰基化ghrelin(1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L)孵育THP-1巨噬细胞株4h后,再加入棕榈酸(200μmol/L)孵育12h。分别测定THP-1巨噬细胞TLR4和NF-κB p65磷酸化的表达水平及其分泌TNF-α和IL-1β的能力。用实时定量PCR检测THP-1巨噬细胞TLR4 mRNA的表达水平;用Western印记检测TLR4蛋白和NF-κB p65磷酸化蛋白水平;用ELISA方法检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β的浓度。
   结果:与空白对照组比较,棕榈酸孵育可增强THP-1巨噬细胞TLR4 mRNA和蛋白的表达水平以及NF-κB p65磷酸化蛋白水平和分泌TNF-α、IL-1β的能力(P<0.05),并随孵育浓度的增加而增强。与棕榈酸(200μmol/L)组比较,酰基化ghrelin孵育可抑制THP-1巨噬细胞TLR4 mRNA(P<0.05)、TLR4蛋白和NF-κ B p65磷酸化蛋白的水平(P<0.01)以及降低THP-1巨噬细胞分泌TNF-α(P<0.05)和IL-1β的水平(P<0.01),此抑制作用随酰基化ghrelin浓度的增加而增强。
   结论:①棕榈酸可剂量依赖性调节THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB上信号通路的活化而促进炎症因子分泌;②酰基化ghrelin可剂量依赖性调节棕榈酸诱导的THP-1巨噬细胞TLR4/NF-κB信号通路的活化,从而抑制炎症因子的分泌。

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