IGF在肝细胞癌的癌组织及其癌旁组织的表达和其与hTERT表达的关系

摘要

目的:通过回顾性病例分析，探讨糖尿病(diabetes mellitus，DM)对肝癌的影响。并收集肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)患者的肝癌及癌旁组织，研究胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ(insulin-like growth factor-1,IGF-Ⅰ)及IGF-Ⅱ(insulin-likegrowth factor-2，IGF-Ⅱ)与端粒酶逆转录酶hTERT在肝癌及癌旁组织中表达的关系，探讨胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ及IGF-Ⅱ在肝癌发展中的作用。
　　 方法:收集某医院210份肝癌患者的入院治疗病案，统计比较糖尿病组及非糖尿病组肝癌患者的肿瘤分期、肿瘤分化程度及血清甲胎蛋白浓度。收集10例来源于某医院手术室肝细胞癌标本，所有标本均带有癌旁肝组织。查阅所有标本的病例资料，制作其病理组织切片。采用逆转录多聚酶链反应技术(ReverseTranscription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测 IGF-1、hTERT在10例人肝癌组织及相应的癌旁组织中的表达情况，并分析它们与肝癌临床病理指标的关系及其之间的相关性。统计学分析采用两独立样本t检验(Student's Test)，Fisher's exact检验，x2检验相关分析(Spearman)，P＜0.05为有差异。
　　 结果:
　　 1.比较有DM组及无DM组病例，DM组患者有更高的TNM分期，两组间有统计学差异(p＜0.05)。两组在年龄、性别、肿瘤分化程度、血清甲胎蛋白浓度方面无统计学差异。
　　 2.IGF-Ⅰ mRNA在癌组织组和癌旁组织组均有表达，两组相比，其差别没有统计学差异(p＞0.05)。
　　 3.IGF-Ⅱ mRNA在癌组织组和癌旁组织组的表达没有统计学差异(p＞0.05)。
　　 4.hTERT mRNA在癌组织有较弱的表达，在相应癌旁组织的几乎无表达，其两组的差别没有统计学意义(p＞0.05)。
　　 5.IGF-Ⅰ mRNA、IGF-Ⅱ mRNA在癌组织的相对表达量（与相应癌旁组织表达量之比）与hTERT mRNA在癌组织的相对表达量（与相应癌旁组织表达量之比）的相关性没有统计学意义(p＞0.05)。
　　 结论:在肝癌患者中，DM组患者有更高的TNM分期。IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ在肝癌组织与癌旁组织的表达没有显著差异。并且，肝癌组织与癌旁组织中，IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表达与hTERT的表达没有伴随关系。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

第一章 前言

第二章 材料和方法

2．1 研究对象与实验标本的选择

2．1．1 研究对象

2．1．2 实验标本

2．2 肿瘤判定标准

2．2 实验标本临床资料

2．3 主要试剂和仪器

2．4 溶液的配制

2．5 标本的处理

2．6 制作病理组织切片

2．6．1 固定

2．6．2 脱水与透明

2．6．3 浸蜡、包埋与修蜡块

2．6．4 切片

2．6．5 脱蜡、染色与脱水

2．7 RT-PCR法检测肝癌及相应的癌旁组织中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ和hTERTmRNA表达

2．7．1 组织总RNA的提出

2．7．2 紫外分光光度仪检测RNA的浓度和纯度

2．7．3 RNA逆转录合成cDNA

2．7．4 聚合酶链反应(PCR)

2．7．5 PCR产物凝胶电泳

2．8 统计分析

第三章 结果

3．1 糖尿病合并肝癌患者与非糖尿病肝癌患者的比较

3．2 癌组织与癌旁组织的鉴定

3．3 各标本所提取的总RNA的纯度与浓度

3．3．1 各标本总RNA的纯度

3．3．2 各标本总RNA的浓度

3．4 IGF-ⅠmRNA在癌组织和相应癌旁组织的表达情况

3．5 IGF-ⅡmRNA在癌组织和相应癌旁组织的表达情况

3．6 hTERT mRNA在癌组织和相应癌旁组织的表达情况

3．7 IGF-Ⅰ mRNA、IGF-Ⅱ mRNA在癌组织的相对表达量与hTERT mRNA在癌组织的相对表达量的关系

3．7．1 IGF-Ⅰ表达量与hTERT表达量的关系

3．7．1 IGF-Ⅱ mRNA表达量与hTERT表达量的关系

第四章 讨论

4．1 糖尿病合并肝癌患者与非糖尿病肝癌患者的比较

4．2 肝癌组织与癌旁组织的鉴定

4．3 IGF-Ⅰ与IGF-Ⅱ在肝癌组织及癌旁组织的表达

4．4 hTERT在肝癌组织及癌旁组织的表达

4．5 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表达与hTERT表达的关系

第五章 结论

参考文献

综述

致谢

攻读硕士学位期间研究成果