IL-1β、IL-6、IL-10在肠易激综合征患者中的表达及临床意义

摘要

研究背景与目的:肠易激综合征(Irritable bowel syndrome，IBS)是一种常见的功能性胃肠疾病，以腹痛或腹部不适、大便性状及排便习惯改变为特征。人群患病率高，且有逐年增高趋势，对患者的生活质量产生很大影响，但其发病机制仍未明确，可能与胃肠道动力异常、内脏高敏感性、肠道低度炎症、肠道过度产气、肠道微生态环境改变、遗传和心理精神因素等有关，近年来越来越多的研究证据也表明IBS患者肠道黏膜免疫活化导致低度炎症存在。
　　 IBS患者免疫活化并不局限在肠壁，外周血中单核细胞分泌细胞因子活性增强及细胞因子基础水平升高是其全身免疫活化的表现，且促炎的细胞因子水平升高和抑炎的细胞因子分泌不足，两者关系的失衡也许在肠易激综合征的发病中起到重要作用，本课题旨在通过研究白细胞介素(Interleukin，IL)1β、IL-6、IL-10在IBS患者和正常对照的外周血和肠黏膜中表达情况，了解是否存在促炎因子和抑炎因子的失衡，探讨其与IBS的临床症状是否相关，为下一步研究IBS的发病机制和IBS的治疗奠定基础。
　　 研究方法:1、根据RomeⅢ标准纳入，并经严格筛查排除后随机选择2011年8月(-)11月在湘雅三医院消化内科就诊的IBS患者40例，同期健康体检者10例做为健康对照，并对其一般资料进行统计学描述。
　　 2、采集病例组以及对照组外周静脉血4ml，离心后取血清，应用酶联免疫吸附试验法（Enzyme Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）检测血清中IL-1β、IL-6、IL-10水平，并应用采用t检验(t-test)、方差分析(analysis of variance，ANOVA)对结果进行统计学分析;
　　 3、电子结肠镜下钳取病例组以及对照组乙状结肠处肠黏膜标本2块，应用免疫组织化学方法(Immunohistochemistry, IHC)检测IL-1β、IL-6、IL-10的表达，并用卡方检验的Fisher确切概率法(Fisher probabilities in2×2 table)对结果进行统计学分析。
　　 4、运用肠易激综合征-生活质量量表(Irritable bowel syndrome-qualityof life questionnaire，IBS-QOL)和肠易激综合征症状严重程度量表(Irritable bowel syndrome-symptom severity scales,IBS-SSS)对IBS患者进行测评，并初步探讨其与细胞因子之间的相关性。
　　 研究结果:
　　 1、外周血中细胞因子的表达:促炎细胞因子IL-1β、IL-6在IBS患者外周血中水平分别为22.58±3.48 pg/ml、42.03±4.65 pg/ml，均高于健康对照组(p＜0.05)，抑炎细胞因子IL-10水平为33.97±4.92pg/ml，与健康对照组相比无统计学差异(p＞0.05)。各亚型间细胞因子水平无统计学差异。
　　 2、肠黏膜中细胞因子的表达:促炎细胞因子IL-1β、IL-6在IBS患者肠黏膜中阳性表达率分别为95％、92.5％，均高于对照组(p＜0.05)，抑炎细胞因子IL-10在病例组阳性表达率为52.5％，与对照组相比，表达无统计学差异。
　　 3、IBS患者经IBS-SSS和IBS-QOL测评，其症状严重程度得分和生活质量得分均数分别为:285±90.5、63.2±25.83，两者之间呈负相关(r=-0.649，p＜0.05)。
　　 4、分别以IBS-SSS和IBS-QOL得分做为因变量，运用多元逐步回归分析法得到各自可能的影响因素:IL-6/IL-10比值和IL-6/IL-10比值、病例亚型、病程。
　　 研究结论:
　　 1、促炎细胞因子IL-1β、IL-6在IBS患者血清中以及肠黏膜中表达水平高于正常对照组，而抑炎细胞因子IL-10在IBS患者和对照组之间的表达无差异，促炎因子和抑炎因子的失衡导致炎症存在，可能在发病中起到作用。
　　 2、炎症因子失衡水平能部分影响IBS患者症状严重程度，炎症失衡水平、病例亚型、病程长短对IBS患者生活质量水平产生影响。

目录

声明

摘要

缩写词简表

前言

技术路线

第一章 对象和方法

1．1 对象

1．1．1 IBS病例纳入

1．1．2 健康对照组

1．2 材料

1．2．1 病例组和对照组一般资料

1．2．2 病例组IBS-SSS和IBS-QOL量表资料

1．2．3 病例组、对照组外周血

1．2．4 病例组、对照组肠黏膜标本

1．2．5 主要试剂

1．2．6 其它材料

1．2．7 主要仪器

1．3 方法

1．3．1 外周血标本和肠黏膜标本的采集和保存

1．3．2 常规石蜡切片制作

1．3．3 苏木精(Hematoxylin，H)和伊红(Eosin，E)染色方法

1．3．4 免疫组化

1．3．5 ELISA

1．3．6 IBS-QOL和IBS-SSS量表测评

第二章 结果

2．1 病例和对照一般资料

2．1．1 病例一般资料

2．1．2 对照组一般资料

2．2 病例组IBS-SSS和IBS-QOL结果

2．2．1 病例组IBS-SSS结果

2．2．2 病例组IBS-QOL结果

2．2．3 IBS-QOL和IBS-SSS相关性分析

2．3 ELISA结果

2．3．1 IBS组和对照组血清中IL-1β、IL-6、IL-10水平

2．3．2 病例组各亚型之间细胞因子水平

2．3．3 ELISA结果和IBS-SSS、IBS-QOL之间相关性分析

2．3．4 以IBS-SSS和IBS-QOL为因变量的多元逐步回归分析

2．4 HE染色结果

2．5 免疫组化结果

2．5．1 IL-1β在病例组和对照中的表达

2．5．2 IL-6在病倒组和对照中的表达

2．5．3 IL-10在病例组和对照中的表达

第三章 讨论

结论

参考文献

综述

附录

致谢

攻读学位期间主要的研究成果