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牛奶酪蛋白各组分与大豆蛋白交叉过敏反应研究

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摘要

第一章 引言

1.1 食物过敏

1.1.1 食物过敏概述

1.1.2 食物过敏原的检测方法

1.2 牛奶过敏

1.2.1 牛奶中的主要过敏原

1.2.2 牛奶中的酪蛋白(casein)

1.2.3 牛奶中的乳清蛋白

1.3 大豆过敏

1.3.1 大豆中的主要过敏原

1.4 食物交叉过敏

1.5 研究内容及意义

第二章 牛奶中酪蛋白的分离纯化

2.1 材料与方法

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验方法

2.2 实验结果

2.2.1 酪蛋白的分离纯化

2.2.2 酪蛋白各组分的纯度鉴定

2.2.3 浓度测定

2.3 讨论

2.3.1 酪蛋白的分离、纯化

2.3.2 蛋白质鉴定以及浓度的鉴定

2.4 本章小结

第三章 大豆过敏原与牛奶酪蛋白的交叉反应研究

3.1 材料与方法

3.1.1 实验材料

3.1.2 实验方法

3.2 实验结果

3.2.1 蛋白质的在线比对结果

3.2.2 间接ELISA检测

3.2.3 Western-blotting验证结果

3.3 讨论

第四章 研究结论

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:牛乳和大豆都是联合国公布的八大类常见过敏食物之一。有研究报道,在牛奶过敏的患者,有一部分患者对大豆存在着交叉过敏反应,但是具体的交叉过敏组分尚未确定,因此,开展交叉过敏反应的组分研究对于合理有效的避免交叉反应的发生、临床用药指导及临床药物筛选模型的建立具有重要的意义。
   方法:采用阴离子交换树脂对酪蛋白的各组分进行分离纯化,并对所得的各组分进行纯度以及浓度鉴定,使用在线数据库氨基酸序列比对,以及ELISA、Western-blot技术测定酪蛋白各组分对大豆抗血清的结合率情况,并进行分析。
   结果:通过阴离子柱分离纯化得到酪蛋白各组分纯品,SDS-PAGE电泳显示达到电泳纯,并分别得到κ-casein、αs1-casein和β-casein和纯品7.90mg、19.94mg、29.88mg;通过在线序列比对以及ELISA和Western-blotting技术检测得到:αs1-casein与大豆蛋白存在交叉过敏现象,其概率为10%;β-casein与大豆蛋白同样存在交叉过敏现象,其概率约为30%;κ-casein与大豆蛋白并无交叉过敏现象存在。
   结论:牛奶酪蛋白组分中αs1-casein与β-casein与大豆过敏蛋白存在交叉过敏反应的可能,概率分别是10%和30%。

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