染料木素对去卵巢大鼠活体疲劳后骨生化指标、骨密度及皮质骨微损伤的研究

摘要

目的:观察染料木素对去卵巢大鼠活体疲劳后皮质骨微损伤、微结构和骨生化指标的影响，为染料木素在绝经后骨质疏松症皮质骨骨量和骨质量方面的作用研究提供动物实验依据。
　　方法:36只7月龄SD雌性大鼠行去卵巢手术后4周建立骨质疏松动物模型，随机分成四组，每组9只，分别为去卵巢对照2周组(OVX2W)，去卵巢对照3周组(OVX3W)，染料木素2周组(GEN2W)和染料木素3周组(GEN3W)。骨质疏松模型建立后开始行骨微损伤试验，即在2％戊巴比妥钠麻醉下，通过利用在本课题组专利骨疲劳试验机基础上改进的平行双夹具更有效率的对活体鼠右侧尺骨进行动态疲劳。再对四组进行干预，OVX2W组、OVX3W组予生理盐水腹腔内注射2周或3周，GEN2W组、GEN3W组则按染料木素5mg/Kg体重腹腔内注射2周或3周。实验终点时行腹主动脉取血，剥离左右尺骨、右侧股骨及胫骨和腰椎。离心血清冻存于-80℃待测骨生化指标。剔除骨周围组织后-80℃冻存待测骨密度，再行右尺骨大块组织碱性品红染色、塑料包埋、切片，显微镜下观察骨微损伤及微结构相关参数。三点弯曲试验检测最大载荷、弹性模量力学参数。腰椎骨灰化比较矿物质成分。
　　结果:
　　1.骨生化指标Ⅰ型原胶原氨基端前肽(PINP)没有差异，但是在去卵巢组间可观察到其随着时间的延长而降低，染料木素组间则相反;抗酒石酸酸性磷酸酶-5b（TRACP-5b）亦出现与PINP相似的时间变化趋势，且其GEN3W组比OVX3W组升高明显;骨钙素(OC)在去卵巢组和染料木素组均随着时间延长而明显下降。
　　2.左右尺骨、右股骨、右胫骨及腰椎的骨密度(BMD)和骨矿盐含量(BMC)无明显统计学差异，但可观察到左右尺骨的BMD和BMC在染料木素组比其同时期的去卵巢组轻微增高，各腰椎的BMC在GEN3W组亦比OVX3W组轻微增加;四组的左尺骨（非疲劳侧）第1亚区域和GEN3W组的左尺骨第2亚区域的BMC比其右尺骨（活体疲劳侧）相应区域均有显著增加;OVX2W组、OVX3W组和GEN2W组的左尺骨第1亚区域和OVX3W组、GEN3W组的左尺骨第2亚区域BMD比其右尺骨相应区域亦有显著增加;染料木素组的右尺骨第1、2亚区域和左尺骨第1、2亚区域的BMD和BMC分别较去卵巢组同时期同侧部位轻微增高。
　　3.骨微损伤及微结构参数均无统计学差异;去卵巢组间的骨微损伤平均长度随时间而增长，染料木素组间则随时间而减短;且染料木素组的微损伤表面密度和微损伤密度均较去卵巢组同时期减少。
　　4.右股骨及右胫骨的最大载荷、弹性模量无明显差异。
　　5.灰含量百分比和有机质含量百分比在去卵巢组间和染料木素组间存在差异;GEN2W组体积有机质含量比OVX2W组明显增加，GEN3W组则比GEN2W组明显下降。
　　结论:
　　1.在去卵巢大鼠活体疲劳后短期内，染料木素协同外界力学刺激，增强破骨作用，加速骨吸收，并增加骨形成，可能对特定部位骨量（受力局部骨量和松质骨丰富的腰椎骨量）具有一定的保留作用;
　　2.短期的染料木素干预后对骨力学性能和骨结构没有显著影响，但是其对皮质骨微损伤可能具有一定的修复作用。

目录

声明

摘要

缩略词表一

缩略词表二

第一章 前言

第二章 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 造模材料

2．1．2 试剂和设备

2．2 方法

2．2．1 实验动物模型的准备

2．2．2 骨转换生化指标的测定

2．2．3 骨密度及骨矿盐含量的测量

2．2．4 骨微损伤染色、包埋、制片及显微镜下的形态计量

2．2．5 生物力学三点弯曲试验和力学参数测量

2．2．6 腰椎骨灰化测量

2．3 统计方法

第三章 结果

3．1 染料木素组与去卵巢对照组骨生化指标比较

3．2 染料木素组与去卵巢对照组骨密度及骨矿盐含量比较

3．3 染料木素组与去卵巢对照组骨微损伤及结构参数比较

3．4 染料木素组与去卵巢对照组生物力学参数比较

3．5 染料木素组与去卵巢对照组腰椎骨有机质和无机盐比较

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述 大豆异黄酮对骨代谢作用的研究进展

攻读学位期间成果

致谢