甲基苯丙胺成瘾大鼠中枢及血浆中差异表达microRNA的发现

摘要

目的：药物成瘾是一种反复发作的慢性脑疾病。而苯丙胺类兴奋剂作为新型毒品滥用趋势更加严峻。发现与苯丙胺类兴奋剂成瘾密切相关的新分子具有重要的科学意义和潜在应用价值。本文的研究目的即为发现与甲基苯丙胺成瘾阶段密切相关的差异表达microRNA，研究其在成瘾不同阶段中发挥的潜在调控作用，探讨其作为候选生物标志物的可能性，为药物成瘾神经生物学机制的阐明及苯丙胺类兴奋剂成瘾的诊断和治疗提供线索。
　　方法：
　　1.通过右颈静脉插管手术建立甲基苯丙胺诱发的大鼠自身给药模型，进行获得性给药训练和递增性给药训练。
　　2.采用miRNA表达谱芯片及SYBR Green实时定量PCR对成瘾相关脑区中miRNA的差异表达水平进行筛选验证。结合生物信息学分析对候选miRNA及预测靶分子进行功能定位，确定候选分子。
　　3.采用实时定量PCR方法检测血浆中循环miRNA。
　　结果：
　　1.建立了能够很好模拟人类药物成瘾行为特征的大鼠甲基苯丙胺自身给药模型，为研究甲基苯丙胺成瘾的神经生物学机制奠定了基础。
　　2.在具有规律性用药特征或强迫性用药特征的甲基苯丙胺成瘾大鼠的背侧纹状体和前额叶皮层中分别发现了12个和8个可能发生差异表达的miRNA分子;生物信息学分析显示miR-x6等11个差异表达的miRNA及其靶分子的功能可能与甲基苯丙胺成瘾及其神经毒性相关，值得深入研究。
　　3.循环miR-x18在具有强迫性用药特征的甲基苯丙胺成瘾大鼠中存在下调趋势;而循环miR-x19两给药组中均呈上调。
　　结论：
　　综上所述，本文建立了能够较好模拟人类成瘾行为特征的大鼠甲基苯丙胺自身给药模型，在成瘾动物的背侧纹状体和前额叶皮层中发现了19个可能发生差异表达的miRNA分子，在血浆中发现了2个可能发生差异表达的循环miRNA分子，为研究miRNA在甲基苯丙胺成瘾中的作用、以及循环miRNA作为甲基苯丙胺成瘾诊断的候选生物标志物的研究提供了线索。