大鼠脑缺血再灌注后BBB通透性和MMP-9、NF-κB表达变化及TPO对其影响

摘要

目的:探讨大鼠脑缺血再灌注之后脑组织中血脑屏障通透性、脑水肿、基质蛋白酶-9(MMP-9)及核转录因子-κB(NF-κB)的表达变化，以及促血小板生成素对它们的影响。
　　方法:采用大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，以线栓法使大鼠接受大脑中动脉闭塞(MCAO)2小时，之后再灌注22小时。将54只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和TPO干预组，其中假手术组仅做麻醉和分离大脑中动脉手术处理，TPO干预组和缺血再灌注组则均接受MCAO2小时之后再灌注22小时。区别在于TPO干预组在再灌注开始时尾静脉给予TPO(0.1 ug/kg)干预，而缺血再灌注组则在再灌注开始时给予同剂量的PBS。将每组大鼠再随机分为3个亚组(n=6)，分别用于脑组织含水量测定、伊文思蓝染色和免疫组织化学及HE染色实验。缺血2小时后，用神经行为学评分评价神经功能缺损程度;再灌注22小时后，检测脑组织中伊文思蓝含量及含水量，评价血脑屏障通透性和脑水肿程度，并用免疫组织化学的方法检测各组大鼠MMP-9及NF-κB的表达。
　　结果:脑缺血2小时再灌注22小时，大鼠出现神经功能缺损症状，脑组织中NF-κB、MMP-9阳性细胞表达增加，伊文思蓝含量和脑组织含水量增加，且NF-κB、MMP-9阳性细胞表达和伊文思蓝含量的变化趋势表现出明显正相关性。TPO干预组NF-κB、MMP-9阳性细胞表达和伊文思蓝含量、脑组织含水量均显著减少，神经功能缺损评分也有改善。
　　结论:TPO可以改善血脑屏障通透性、减轻脑水肿，其机制可能是通过抑制脑组织中NF-κB、MMP-9的表达。

目录

声明

摘要

缩略词表

1 前言

2 材料和方法

2．1 实验试剂

2．1．1 主要试剂

2．1．2 主要试剂的配制

2．2 主要仪器

2．3 动物分组和模型建立

2．3．1 实验动物和分组

2．3．2 大鼠局灶性脑缺血再灌注模型

2．3．3 神经功能缺损评分

2．3．4 取脑及切片的制备

2．4 实验方法

2．4．1 TTC染色

2．4．2 伊文思染色

2．4．3 脑组织含水量

2．4．4 HE染色

2．4．5 免疫组化染色

2．5 图像分析和数据处理

3 实验结果

3．1 神经功能缺损评分

3．2 TTC染色

3．3 伊文思蓝含量测定

3．4 脑组织含水量测定

3．5 病理学改变

3．5．1 HE染色

3．5．2 MMP-9的表达变化

3．5．3 NF-κB的表达变化

3．6 相关分析

4 讨论

4．1 实验设计和局灶性脑缺血再灌注模型的评价

4．2 血脑屏障通透性和脑水肿的变化

4．3 MMP-9表达的变化

4．4 NF-κB表达的变化

4．5 TPO的对血脑屏障通透性及MMP-9、NF-κB表达的影响

5 结论

附图

参考文献

综述 NF-κB与脑缺血再灌注损伤

攻读硕士学位期间承担的科研任务与主要成果

致谢