水飞蓟宾诱导唾液腺腺样囊性癌ACC-M细胞自噬的研究

摘要

本文对水飞蓟宾诱导唾液腺腺样囊性癌ACC--M细胞自噬进行了研究。本研究分为两个部分：
　　第一部分：自噬相关蛋白在腺样囊性癌组织中的表达及其意义。
　　目的：研究微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein1 light chain3，LC3)在唾液腺腺样囊性癌组织中的表达并探讨其在腺样囊性癌发生发展中的作用。
　　方法：免疫组织化学方法检测45例腺样囊性癌组织及23例正常唾液腺组织标本中LC3的表达。
　　结果：腺样囊性癌组织和正常腺体组织中LC3表达阳性率分别为42.22％和91.30％，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论：LC3在腺样囊性癌组织中的阳性表达低于正常腺体组织，自噬可能与腺样囊性癌的发生发展有关。
　　第二部分：水飞蓟宾诱导唾液腺腺样囊性癌ACC-M细胞自噬的实验研究。
　　目的：探讨水飞蓟宾(silibinin，SB)对人唾液腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖及自噬的影响。
　　方法：MTT法检测水飞蓟宾对ACC-M细胞体外生长的抑制作用;倒置相差显微镜观察水飞蓟宾对ACC-M细胞形态学的影口向;丹磺酰戊二胺(monodansyl cadaverine，MDC)染色及透射电子显微镜观察自噬体形成;Western blot检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链-3(microtubule associated protein1 light chain3，LC3)表达的变化，数据以(x)±s表示，采用SPSS13.0软件包进行单因素方差分析，P＜0.05为差异具有显著性。
　　结果：水飞蓟宾呈剂量和时间依赖的方式抑制ACC-M细胞生长，并诱导细胞发生自噬;MDC染色可见自噬体增多，细胞质内呈密集的点状亮绿色荧光，电镜下实验组细胞内可见到双层膜结构;Western blot显示水飞蓟宾上调ACC-M细胞LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白的表达，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值随着水飞蓟宾干预剂量的增大和时间的延长而增加。
　　结论：水飞蓟宾能抑制ACC-M细胞的体外增殖，并能诱导细胞发生自噬。