二烯丙基化三硫对粪肠球菌毒力因子esp、gelE基因表达的影响

摘要

目的:
　　研究大蒜素对照品二烯丙基化三硫（dially trisulfide，DATS）和多西环素对粪肠球菌生物膜形成相关毒力因子esp、gelE基因表达的影响，分析DATS对粪肠球菌的抑菌或杀菌作用，为临床推广使用大蒜素为根管内封药物提供实验依据。
　　方法:
　　采用MTT法测定粪肠球菌生长曲线，建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型，分别用1280μg/ml、2560μg/ml、5120μg/mlDATS和80μg/ml、160μg/ml、320μg/ml多西环素作用于各时期粪肠球菌生物膜，提取细菌生物膜样本。采用Real-time PCR技术，对不同时期的粪肠球菌生物膜毒力因子esp、gelE的基因表达相对量进行检测。
　　结果:
　　1.DATS和多西环素作用后，粪肠球菌生物膜esp、gelE基因表达相对量均低于用药前，差异有统计学意义(p＜0.05)。
　　2.药物作用后esp基因表达相对量情况
　　DATS组随药物浓度增高，粪肠球菌生物膜esp基因表达相对量降低，5120μg/ml DATS和2560μg/ml DATS组的基因表达相对量低于1280μg/ml DATS组，差异有统计学意义(p＜0.05);多西环素组随药物浓度增高，粪肠球菌生物膜esp基因表达相对量降低，差异有统计学意义(p＜0.05);在对数期，2560μg/ml、5120μg/ml DATS组与160μg/ml多西环素组的esp基因表达相对量差异无统计学意义(p＞0.05);在稳定期和饥饿期，2560μg/ml、5120μg/ml DATS组与80μg/ml多西环素组的esp基因表达相对量差异无统计学意义(p＞0.05)。
　　3.药物作用后gelE基因表达相对量情况
　　DATS组随药物浓度增高，粪肠球菌生物膜gelE基因表达相对量降低，差异有统计学意义(p＜0.05);多西环素组随药物浓度增高，粪肠球菌生物膜gelE基因表达相对量降低，差异有统计学意义(p＜0.05);在对数期和稳定期，5120μg/ml DATS组与160μg/ml多西环素组的gelE基因表达相对量差异无统计学意义(p＞0.05);在饥饿期，5120μg/ml DATS组与80μg/ml多西环素组的gelE基因表达相对量差异无统计学意义(p＞0.05)。
　　4.饥饿期粪肠球菌生物膜esp、gelE基因表达相对量，高于稳定期和对数期，差异有统计学意义(p＜0.05)。
　　结论:
　　1.DATS、多西环素能抑制粪肠球菌毒力因子esp、 grlE的表达。
　　2.2560μg/ml或5120μg/mlDATS抑制粪肠球菌毒力因子esp、gelE表达作用，与80μg/ml或160μg/ml多西环素作用相当。
　　3.饥饿期粪肠球菌毒力因子esp、gelE的相对表达量高于对数期和稳定期。