甲基强的松龙对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤高迁移率蛋白1表达的影响

摘要

目的：通过检测脂多糖诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中高迁移率蛋白1(HMGB1)mRNA及其蛋白表达水平，以及甲基强的松龙注射剂干预后对急性肺损伤大鼠肺组织HMGB1表达的影响，探讨HMGB1在脂多糖诱导的急性肺损伤中的作用，以及甲基强的松龙注射剂干预后在急性肺损伤中的表达变化。
　　方法：清洁级雄性SD大鼠54只，随机分成3组，每组18只;(1)正常对照组（N组）:每只尾静脉注射生理盐水2ml/kg，1小时后再尾静脉注射生理盐水1ml/kg;(2)急性肺损伤组(ALI组):尾静脉注射脂多糖6mg/kg，1小时后再尾静脉注射生理盐水1ml/kg;(3)甲基强的松龙干预组(MPN组):每只尾静脉注射脂多糖6mg/kg，1小时后再尾静脉注射甲基强的松龙20mg/kg。观察各组大鼠行为改变，三组分别于注射后12h、24h、36h采集标本，每个时相点6只大鼠。采集动脉血气，放血后取部分肺组织行HE染色，观察肺组织病理学改变，并测定干湿比重(W/D);采用免疫组织化学法和Real-TimePCR法检测大鼠肺组织HMGB1表达水平。
　　结果：⑴各组一般状况的变化:ALI组大鼠12h后出现毛发竖直，蜷作一团，呼吸急促，爪趾发绀，反应迟钝，萎靡厌食，排便减少或性状改变，24h最明显，36h症状有所减轻;MPN组症状轻于同时点ALI组。⑵各组干湿比重的变化:ALI组大鼠肺干湿比重（W/D）明显增加，各时相点与N组比较差异均有显著统计学意义(P＜0.01)，但各时相点之间无统计学差异(P＞0.05)，MPN组肺干湿比重(W/D)增高，与N组比较有统计学意义(P＜0.01)，MPN组与ALI组比较肺干湿比重(W/D)下降。⑶各组血气变化:N组PO2正常，ALI组大鼠血气分析PO2明显下降(P＜0.05)，MPN组PO2下降，同一时相点较ALI组减轻。⑷各组肺组织病理改变:N组大鼠肺组织小叶结构清晰，肺泡腔及肺泡间质无炎性细胞浸润。ALI组肺组织呈不同程度肿胀，表面散在紫红色淤血斑，肺泡壁间隔增宽，肺泡及肺血管明显充血水肿，肺泡腔内见红细胞及炎性细胞渗出，肺间质也见大量炎症细胞浸润，且随着时间的延长，肺组织病理改变逐渐加重，24h最明显，36h有所减轻。MPN组较同一时相点ALI组肺组织改变有不同程度的减轻。⑸各组肺组织中HMGB1表达变化:正常组中大鼠肺组织有少量HMGB1mRNA及其蛋白表达，ALI组和MPN组大鼠肺组织中HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平明显高于N组(均P＜0.05)，且随着时间延长呈逐渐增加趋势，24h HMGB1 mRNA表达达峰值;同一时相点ALI组大鼠肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平高于MPN组(P＜0.05)。
　　结论：①急性肺损伤中肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达明显升高，且24h时达高峰，36h下降但仍高于N组，提示HMGB1在炎症后期持续性高水平表达，在ALI发生、发展过程中尤其是ALI后期失控性炎症反应过程中可能发挥重要作用。②甲基强的松龙注射剂干预后急性肺损伤中肺组织HMGB1mRNA及其蛋白表达较急性肺损伤组有所降低，可有效改善大鼠急性肺损伤的炎症反应，对脂多糖所致的急性肺损伤有一定的保护作用。