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孕酮对发育期反复惊厥大鼠海马区GAT-1和GLT-1表达的影响

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摘要

缩略词表

前言

第一章 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法及步骤

1.3 统计学分析

第二章 结果

2.1 实验动物数量及行为分析

2.2 免疫组织化学检测结果

2.3 Western blot检测结果

第三章 讨论

3.1 GLT-1与惊厥

3.2 GAT-1与惊厥

3.3 孕酮与惊厥

第四章 结论

参考文献

综述 孕酮、GABA转运体与癫痫

攻读学位期间主要的研究成果

致谢

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摘要

目的:研究发育期大鼠反复惊厥海马区γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)和谷氨酸转运体-1(GLT-1)的变化以及孕酮对其变化的影响,探讨GAT-1及GLT-1在婴幼儿时期惊厥性脑损伤发病机制的作用及孕酮抗惊厥的可能机制。
  方法:将7日龄(postnatal7,PN7)SD大鼠随机分为3组(对照组、惊厥组及孕酮干预组),每组24只大鼠。将惊厥组及孕酮干预组大鼠吸入三氟乙醚(每日一次,每次持续30min,连续6天)制作发育期反复惊厥模型。其中孕酮干预组在每次惊厥后肌肉注射16mg/kg孕酮。分别于PN13d、PN15d和PN19d(分别相当于最后一次惊厥后1d、3d和7d)每组各取8只大鼠断头取脑,分别采用免疫组织化学及Western Blot方法观察各组海马区γ-氨基丁酸转运体-1及谷氨酸转运体-1水平的变化。
  结果:在各时间点,惊厥组大鼠海马区γ-氨基丁酸转运体-1及谷氨酸转运体-1免疫组织化学累计光密度(AOD值)较对照组显著升高(P<0.05),孕酮干预组海马区谷氨酸转运体-1免疫组织化学AOD值显著高于对照组和惊厥组(P<0.05),而γ-氨基丁酸转运体免疫组织化学AOD值显著低于惊厥组,仅PN13d时明显高于对照组(P<0.05)。Western Blot结果显示惊厥组大鼠海马区GAT-1及GLT-1蛋白的表达较对照组显著上调,孕酮干预组海马区各时间点GLT-1蛋白表达较对照组和惊厥组均明显升高,而GAT-1蛋白表达较惊厥组显著降低,但仍显著高于对照组(P<0.05)。
  结论:发育期反复惊厥可导致海马区GAT-1及GLT-1表达出现异常,说明它们可能参与惊厥性脑损伤的病理过程;孕酮可通过调节这一病理过程,维持脑内兴奋—抑制系统的平衡从而发挥抗惊厥作用。

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