LPS致炎性大鼠神经炎症脑内AD样轴突病变的实验研究

摘要

目的:观察海马内注射LPS诱导的大鼠神经炎症脑内淀粉样蛋白生成分子，尤其是限速酶BACE1的表达变化，探讨神经炎症与AD样轴突病变的相关关系。
　　方法:将24只成年SD雄性大鼠随机分为实验组和对照组。利用立体定位技术，在大鼠右侧海马内注入LPS或PBS，动物存活30d。运用免疫组织化学染色方法观察大鼠脑内MHC-Ⅱ的表达，采用免疫荧光双重标记技术观察MHC-Ⅱ/GFAP（星形胶质细胞标记物）和MHC-Ⅱ/CD11b（小胶质细胞标志物）的共表达;运用Western blot免疫印迹技术和免疫组织化学染色方法检测大鼠脑内BACE1的表达;采用免疫荧光双重标记技术观察大鼠脑内BACE1/APP、BACE1/Aβ、BACE1/MAP2（树突标记物）和BACE1/SYN（轴突标记物）的共表达。
　　结果:注射LPS的大鼠注射侧皮质和海马内MHC-Ⅱ的表达上调，且上调的MHC-Ⅱ主要表达在小胶质细胞，少部分表达在星形胶质细胞;与对照组相比，LPS处理的大鼠注射侧皮质和海马内BACE1表达上调;上调的BACE1主要定位于失营养性神经轴突末梢，同时BACE1与APP和Aβ存在共表达。
　　结论:LPS诱导的神经炎症大鼠脑内皮质和海马区域BACE1表达上调，且BACE1的上调伴随着AD样轴突病变。神经炎症可能是大鼠脑内AD样轴突病变的一个始动因素。

目录

声明

摘要

1 前言

2 材料与方法

2．1 实验动物

2．2 实验试剂及仪器

2．3 实验方法

2．3．1 模型制作

2．3．2 组织获取

2．3．3 免疫组织化学染色

2．3．4 免疫荧光双重标记组织化学染色

2．3．5 蛋白质免疫印迹分析(Western Blot analysis)

2．4 数据收集和处理

3 结果

3．1 海马内注射LPS后，皮质及海马内免疫炎症反应

3．2 海马内注射LPS后，皮质、海马内BACE1的表达变化

3．3 海马内注射LPS后，大鼠脑内轴突的病理变化

4 讨论

4．1 LPS模型可用来研究慢性神经退行性疾病的病理

4．2 LPS诱导的神经炎症中BACE1的表达变化

4．3 LPS诱导的神经炎症中轴突病理

5 结论

参考文献

综述 阿尔茨海默病淀粉样病变的机制研究

在读期间发表的学术论文及科研成果

致谢