GRIN2B、SLC6A3、SLC18A2基因多态性与帕金森病异动症的相关性研究

摘要

第一章：帕金森病异动症发病的相关因素分析
　　研究背景:多巴胺的前体物质——左旋多巴是治疗帕金森病（Parkinson's disease，PD）的有效药物，但是患者长期使用这些药物后会出现异动症(levodopa-induced dyskinesia，LID)等运动并发症，严重影响了药物疗效和患者的生活质量。然而并不是所有PD患者都会出现LID。LID发生的危险因素包括性别，发病年龄，病情的严重程度，以及使用左旋多巴的剂量、疗程等。对于这些相关因素与LID的发病关系国内鲜有报道。研究目的:本研究旨在分析本组人群中相关因素与PD LID发生的关系。研究方法:应用统一PD评分量表(UPDRS)第Ⅱ、Ⅲ部分和第Ⅳ-A部分，H-Y分期评分共随访了410例PD患者，将UPDRS量表第Ⅳ-A部分32项≥1分的患者纳入LID组，并与非LID组的年龄、性别、发病年龄、主要临床亚型、病程及使用多巴制剂的疗程，当前的治疗情况等因素进行统计分析。研究结果:412例PD患者中的316例病程≥3年，其中的99例患者出现异动症，LID组与非LID组在发病年龄、病程，使用左旋多巴日剂量及UPDRS量表第Ⅲ部分评分之间差异有统计学意义。LID相关的多因素Logistic回归分析显示，发病年龄、病程及使用左旋多巴的日剂量是LID发生的独立危险因素。结论:较早发病，病程较长以及使用左旋多巴日剂量较大的PD患者易发生LID。
　　第二章 GRIN2B基因多态性与帕金森病异动症发病风险的相关性研究
　　研究背景:在帕金森病(PD)异动症(LID)的动物模型研究中，发现GRIN2B基因编码的离子型谷氨酸NMDA受体NR2B结构与功能的异常参与LID的发生。不同的个体在GRIN2B基因通常呈现遗传单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP），这种SNPs影响了受体的临床疗效，表现为不同PD患者LID的发病存在着差异。目前国内对于GRIN2B基因的遗传变异与PD患者LID发病风险的研究鲜有报道。研究目的:本研究旨在探讨GRIN2B基因的遗传变异与中国南方汉族人群PD患者LID发病的相关性。研究方法:采用DNA直接测序结合飞行时间质谱分析的方法，检测了中国南方汉族人群316例散发性PD患者（病程≥3年），其中包括发生LID的99例患者，以及200例健康对照者GRIN2B基因的6个SNPs:rs34315573、 rs7301328、rs1805522、rs1806201、rs1806191和rs1805246。研究结果:1.rs1806191位点变异在本组人群中出现的频率＜5％。2.rs34315573, rs7301328, rs1805522, rs1806201及rs1805246在该组PD患者和正常对照之间，以及PD-LID与PD非LID之间的等位基因、基因型分布频率无统计学差异。结论:GRIN2B基因rs34315573，rs7301328，rs1805522，rs1806201，及rs1805246与中国南方汉族人群PD及PD-LID的发病无相关性。
　　第三章 SLC6A3基因多态性与帕金森病异动症发病风险的相关性研究
　　研究背景:SLC6A3基因编码的多巴胺转运体(dopaminetransporter，DAT)在多巴胺(DA)转运过程中发挥了关键作用。SLC6A3基因的遗传变异可能会影响DAT的表达，进而影响DA的转运，体现在临床治疗上就是影响药物的疗效。帕金森病(PD)患者携带不同类型的SLC6A3基因遗传变异，在接受了左旋多巴治疗后的反应就会不同，表现为不同PD患者异动症(LID)的发病存在着差异。目前国内对于SLC6A3基因的遗传变异与PD患者LID发病风险的研究报道较少。研究目的:本研究旨在探讨SLC6A3基因的遗传变异与中国南方汉族人群PD患者LID发病的相关性。研究方法:采用DNA直接测序结合飞行时间质谱分析的方法，检测了中国南方汉族人群316例散发性PD患者（病程≥3年），其中包括发生LID的99例患者，以及200例健康对照者SLC6A3基因的2个SNPs: rs6347、rs2270912。研究结果:1.rs2270912位点变异在本组人群中出现的频率＜5％。2.rs6347在该组PD患者和正常对照之间，以及PD-LID与PD-非LID之间的等位基因、基因型分布频率无统计学差异。结论:SLC6A3基因rs6347与中国南方汉族人群PD及PD-LID的发病无相关性。
　　第四章 SLC18A2基因多态性与帕金森病异动症发病风险的相关性研究
　　:研究背景:SLC18A2基因编码的Ⅱ型囊泡单胺转运体(vesicularmonoamine transporter subtype2，VMAT2)参与多巴胺(DA)的储存和释放，在帕金森病(PD)的发病过程中起着重要作用。SLC18A2基因发生遗传变异，影响了VMAT2的表达，可能改变左旋多巴治疗后DA在PD患者体内的储存或释放。PD患者携带不同类型SLC18A2基因的遗传变异，其异动症的发病存在着差异。目前国内尚无SLC18A2基因的遗传变异与PD及PD-LID发病风险的研究报道。研究目的:本研究旨在探讨SLC18A2基因的遗传变异与中国南方汉族人群PD患者LID发病的相关性。研究方法:采用DNA直接测序结合飞行时间质谱分析的方法，检测中国南方汉族人群316例散发性PD患者（病程≥3年），其中包括发生LID的99例患者，以及200例健康对照者SLC18A2基因的9个SNPs:rs60912143、rs2619095、rs12412905、 rs60543597、 rs363387、 rs363411、rs363420、 rs363272及c.116T＞C。研究结果:1.c.116T＞C位点变异在本组人群中出现的频率＜5％。2.rs60912143、rs12412905、rs363387、rs363411、rs363420、rs363272的等位基因、基因型分布频率在该组PD患者和正常对照之间，以及PD-LID与PD-非LID之间无统计学差异。3.rs2619095及rs60543597位点的等位基因、基因型分布频率在该组PD患者和正常对照之间无统计学差异。4.rs2619095及rs60543597位点的基因型分布频率在该组PD-LID及PD-非LID患者之间有统计学差异。结论:1.SLC18A2基因rs60912143、rs12412905、rs363387、rs363411、rs363420及rs363272与中国南方汉族人群PD及PD-LID的发病无相关性。2.SLC18A2基因rs2619095和rs60543597与中国南方汉族人群PD的发病无关，可能与PD-LID的发病相关。

目录

声明

摘要

略词表

第一章 帕金森病异动症发病的相关因素分析

第一节 绪论

第二节 研究对象和方法

1．研究对象

2．实验方法

3．统计学分析

第三节 结果

3．1 研究对象的一般情况

3．2 本组PD患者的临床评分

3．3 PD患者发生LID的危险因素分析

第四节 讨论

第五节 结论

第二章 GRIN2B基因多态与PD异动症发病风险的相关性研究

第一节 绪论

第二节 研究对象和方法

1．研究对象

2．主要试剂、耗材及试剂配制

3．主要仪器

4．实验方法

5．统计学分析

第三节 结果

3．1 PD病例组与对照组的一般资料比较

3．2 GRIN2B基因SNPs测序结果

3．3 GRIN2B基因SNPs在本组人群中的分布

3．4 GRIN2B基因SNPs的连锁不平衡分析

3．5 GRIN2B基因SNPs等位基因、基因型在PD病例组和正常对照组中的差异分析

3．6 GRIN2B基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中差异性分析

3．7 GRIN2B基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按性别分组分析

3．8 GRIN2B基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按发病年龄分组分析

3．9 GRIN2B基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按病程分组分析

3．10 GRIN2B基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按LEDD分组分析

第四节 讨论

第五节 结论

第三章 SLC6A3基因多态与PD异动症发病风险的相关性研究

第一节 绪论

第二节 研究对象和方法

1．研究对象

2．主要试剂、耗材及试剂配制

3．主要仪器

4．实验方法

5．统计学分析

第三节 结果

3．1 SLC6A3基因SNPs测序结果

3．2 SLC6A3基因SNPs在本组人群中的分布

3．3 rs6347等位基因、基因型在PD病例组和正常对照组中差异性分析

3．4 rs6347等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中差异性分析

3．5 rs6347等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按性别分组分析

3．6 rs6347等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按发病年龄分组分析

3．7 rs6347等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按病程分组分析

3．8 rs6347等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按LEDD分组分析

第四节 讨论

第五节 结论

第四章 SLC18A2基因多态与PD异动症发病风险的相关性研究

第一节 绪论

第二节 研究对象和方法

1．研究对象

2．主要试剂、耗材及试剂配制

3．主要仪器

4．实验方法

5．统计学分析

第三节 结果

3．1 SLC18A2基因SNPs测序结果

3．2 SLC18A2基因SNPs在本组人群中的分布

3．3 SLC18A2基因SNPs连锁不平衡分析

3．4 SLC18A2基因SNPs等位基因、基因型频率在PD病例组和正常对照组中的差异分析

3．5 SLC18A2基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中的差异分析

3．6 SLC18A2基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按性别分组分析

3．7 SLC18A2基因8个SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按发病年龄分组分析

3．8 SLC18A2基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按病程分组分析

3．9 SLC18A2基因SNPs等位基因、基因型在PD-LID与PD-非LID组中按LEDD分组分析

第四节 讨论

第五节 结论

参考文献

综述 帕金森病异动症的研究进展

攻读学位期间的研究成果

致谢