共振光散射在核酸、蛋白质及双酚A测定中的应用

摘要

核酸与蛋白质是重要的生命物质,其定量测定在生物化学,化学,临床医学诊断领域具有重要的作用。建立超高灵敏度与选择性的环境激素的分析和监测方法具有重大的现实意义。本文在大量文献调研的基础上,采用噻吩磺隆-西玛津,2,4-二氯苯氧乙酸-十六烷基三甲基溴化胺(2,4-D-CTMAB)为核酸探针,福辛普利钠为蛋白质探针,β-环糊精(β-CD)为双酚A(BPA)探针,结合多种光谱法和电镜分析探讨了作用机理,建立了2个测定核酸,1个测定蛋白质、BPA的简便、快速、选择性好、灵敏度较高的新方法。
　　以噻吩磺隆-西玛津为鱼精脱氧核糖核酸(fsDNA)的共振光散射(RLS)探针,研究了三者之间的相互作用和反应的 RLS光谱,荧光光谱,紫外光谱和原子力显微镜(AFM)特性,建立了测定fsDNA增强的RLS新方法。在最佳实验条件下,fsDNA含量和增强的RLS信号(△IRLS)在0.025mg/L～4mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.9990,检测限可达3.23ng/mL。
　　以2,4-D-CTMAB为fsDNA的RLS探针,研究了反应的RLS光谱,荧光光谱,紫外光谱和AFM特性,探讨了三者相互作用的反应机理,建立了测定fsDNA增强的RLS新方法。在pH11.0碱性BR缓冲介质中,在345nm RLS波长处,fsDNA含量和△IRLS在0.2mg/L~1.6mg/L范围内呈良好的线性关系,应用于测定合成分析样品,结果满意。
　　基于福辛普利钠增强的RLS技术,建立了一种检测痕量牛血清蛋白(BSA)的方法。运用RLS光谱,荧光光谱,紫外光谱与AFM技术,探讨了二者相互作用的反应机理。在最佳的实验条件下,BSA含量和△IRLS在0.05mg/L~5mg/L范围内呈良好的线性关系,该方法成功地应用于BSA测定。
　　利用β-CD包合复合物,运用RLS技术对垃圾渗透液中的BPA进行了测定。β-CD-BPA二元复合物在pH3.26的BR缓冲溶液中能引起RLS信号大大增强,分别在0.01mg/L～0.1mg/L和0.1mg/L～10mg/L范围内呈线性关系,在这基础上实现了BPA的定量检测和环境监测。并运用荧光光谱,紫外光谱,AFM,结合RLS光谱,研究了β-CD和BPA的作用机理。该方法对BPA具有很好的专属性。
　　根据RLS光谱,荧光光谱,紫外光谱,AFM图像以及条件实验,从分子水平探讨了复合物噻吩磺隆-西玛津,2,4-D-CTMAB联合作用对核酸的影响,研究了复合污染物的生物毒性机理。

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第1章 引言

1.1 核酸测定方法

1.2 蛋白质测定方法

1.3 环境激素检测方法

1.4 复合污染物毒性评价方法

1.5 共振光散射技术的应用领域

1.6 论文的选题依据、研究内容与创新

第2章 噻吩磺隆－西玛津与核酸作用的共振散射光谱法研究

2.1 实验部分

2.2 结果与讨论

2.3 分析应用

2.4结论

第3章2，4－二氯苯氧乙酸－十六烷基三甲基溴化胺与核酸作用的共振光散射光谱法研究

3.1 实验部分

3.2 结果与讨论

3.3 分析应用

3.4 结论

第4章 福辛普利钠与牛血清蛋白作用的共振光散射光谱法研究

4.1实验部分

4.2 结果与讨论

4.3 分析应用

4.4 结论

第5章 β－环糊精包合复合物共振光散射光谱法测定垃圾渗透液中的双酚A

5.1实验部分

5.2 结果与讨论

5.3 分析应用

5.4 结论

第6章 复合污染物与鱼精DNA相互作用的多种光谱学手段研究

6.1 噻吩磺隆－西玛津复合污染物与fsDNA的相互作用

6.2 2，4－二氯苯氧乙酸－十六烷基三甲基溴化铵复合污染物与fsDNA的相互作用

6.3 结论

结论与展望

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文