Ibrolipim通过LXRα途径促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1和ABCG1的表达及胆固醇流出

摘要

目的：本研究以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象，采用多种实验方法，探讨Ibrolipim对ABCA1（ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1）、ABCG1（ATP-binding cassette transporter G1, ABCG1）表达和胆固醇流出的影响，并进一步探讨其可能机制。
　　方法: THP-1单核细胞经PMA诱导贴壁后，加入oxLDL诱导其转化为泡沫细胞，经各种因素处理后，运用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,用实时荧光定量 PCR和Western印迹分析法分别检测ABCA1、ABCG1和肝X受体α（liver X receptorα, LXRα）mRNA与蛋白质的水平。
　　结果:实验结果显示，Ibrolipim能在基因和蛋白水平明显增加ABCA1、ABCG1和LXRα的表达，促进细胞内胆固醇流出并减少细胞内胆固醇含量。LXRα-siRNA能减弱Ibrolipim上调ABCA1和ABCG1的作用，逆转Ibrolipim引起的细胞内胆固醇流出增加和胆固醇含量减少。
　　结论：Ibrolipim通过LXRα途径促进THP-1源性巨噬细胞ABCA1和ABCG1的表达，从而增加 THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出，减少细胞内胆固醇含量。

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中文摘要

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前言

实 验 材 料

一、细胞、培养基及血清

二、主要试剂与配制

三、主要仪器与器材

实 验 方 法

一． 低密度脂蛋白的分离、氧化修饰及鉴定

二． 细胞培养

三． 胆固醇流出实验

四． 高效液相色谱分析 [21-23]

五．实时定量PCR

六．siRNA序列设计、载体构建及转染

七．细胞蛋白抽提

八．Western 印迹

九．统计学分析

实 验 结 果

一． Ibrolipim上调THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1和ABCG1的表达

二． Ibrolipim促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇的流出

三．LXRα介导Ibrolipim上调细胞ABCA1和ABCG1的表达

讨 论

结 论

参考文献

附 录

文 献 综 述

参 考 文 献

硕士期间发表的论文

致谢