枸橼酸钾预防雄性大鼠草酸钙肾结石的实验研究

摘要

目的：采用乙二醇和氯化铵诱导SD雄性大鼠草酸钙肾结石动物模型；应用枸橼酸钾干预，探讨枸橼酸钾预防SD雄性大鼠草酸钙结石的疗效及其机制。为草酸钙结石的预防提供材料和思路。
　　方法：
　　1、选择1％乙二醇+1%氯化铵的自来水饮水法来建立SD雄性大鼠高草酸尿症模型。
　　2、将24只健康SD雄性大鼠随机分为三组，每组8只。A组(正常对照组)；B组（成石组）；C组（枸橼酸钾干预组）。
　　3、2周后，检测各组大鼠的24h尿草酸(Ox)浓度、钙离子(Ca2+)浓度；血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、Ca2+、磷(P)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肾组织的SOD活力、MDA含量；各组肾组织行HE染色，光镜下观察肾小管腔内的结石晶体及肾小管扩张情况；免疫组织化学检测各组大鼠肾组织骨桥蛋白(OPN蛋白)的表达水平。
　　结果：
　　1、尿液检测指标结果24h尿Ox浓度结果：A组明显低于B、C组(P＜0.05)，C组明显低于B组(P﹤0.05)。
　　24h尿 Ca2+浓度结果：A组明显低于B、C组(P﹤0.05)，C组明显低于B组(P﹤0.05)。
　　2、血液检测指标结果血清BUN、Cr含量结果：A组明显低于B、C组(P＜0.05)；B组与C组比较，C组中的血清BUN有下降趋势，差别无统计学意义(P=0.076，P﹥0.05)； C组中的血清Cr浓度明显下降，差别有统计学意义(P＜0.05)。
　　各组血Ca2+、P浓度结果，差别无统计学意义(P﹥0.05)。
　　大鼠血清SOD活力及MDA含量结果：与A组比较，B组大鼠血清及肾组织SOD活力水平明显降低(P＜0.05)，MDA含量明显升高(P＜0.05)；与B组比较，C组大鼠血清SOD活力明显增高(P＜0.05)，MDA含量明显降低(P＜0.05)；A与C组比较，C组血清SOD活力水平有下降趋势，差别无统计学意义(P=0.064， P﹥0.05)，血清MDA含量明显升高(P＜0.05)。
　　3、肾组织检测指标结果大鼠肾组织SOD活力及MDA含量结果：与A组比较，B组大鼠血清及肾组织SOD活力水平明显降低(P＜0.05)，MDA含量明显升高(P＜0.05)；与B组比较，C组大鼠血清SOD活力明显增高(P＜0.05)，MDA含量明显降低(P＜0.05)；A与C组比较，C组血清SOD活力水平明显下降(P＜0.05)，血清MDA含量明显升高(P＜0.05)。
　　4、HE染色及结石晶体评分结果：A组肾小管正常；B组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在，管腔明显扩张；C组肾小管腔仅见少许散在草酸钙结晶存在，管腔未见明显扩张。结石晶体评分提示C组结石晶体明显较B组减少，差别有统计学意义(P＜0.05)。
　　5、OPN蛋白免疫组化结果：A组OPN蛋白主要呈微弱表达；B组OPN蛋白主要呈强表达；C组OPN蛋白主要呈弱表达。三组间差别有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论：
　　1、选择含1%乙二醇和1%氯化铵的自来水饮水法二个星期，能成功诱导形成SD雄性大鼠草酸钙肾结石模型。
　　2、实验结果发现通过枸橼酸钾灌胃，能够有效抑制 SD雄性大鼠肾脏草酸钙结石晶体形成。
　　3、枸橼酸钾预防草酸钙结石的机理可能是，枸橼酸盐同钙络合，使尿离子钙浓度下降，草酸钙的饱和度降低；通过抗氧化作用，降低过多的氧自由基，保护肾小管上皮；同时有效抑制大鼠肾组织OPN的表达，减少肾组织草酸钙结晶的沉积，从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。

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英文缩略名词对照表

中文摘要

英文摘要

前 言

一、材料

1、实验动物

2、主要实验药品、试剂及来源

3、仪器、设备

4、主要试剂的配制

二、实验方法

1、动物实验分组

2、检测指标与检测方法

3、实验数据的统计学分析

结 果

1、各组大鼠一般情况比较

2、各组大鼠24h尿草酸浓度、钙离子浓度的变化情况（见表4）

3、各组大鼠血生化指标（见表5）

4、各组大鼠血清SOD活力及MDA含量（见表6）

5、各组大鼠肾组织SOD活力及MDA含量（见表7）

6、各组大鼠肾小管草酸钙结晶评分情况

7、各组大鼠肾小管草酸钙结晶HE染色情况

8、各组大鼠OPN蛋白的免疫组化结果

9、各组大鼠肾脏组织OPN蛋白表达情况

讨 论

1、草酸钙肾结石模型的建立

2、枸橼酸钾对尿草酸、尿钙的影响

3、枸橼酸钾对血清BUN、Cr 、Ca2+、P指标的影响

4、枸橼酸钾在草酸钙肾结石中的抗氧化作用

5、枸橼酸钾对肾脏组织中OPN蛋白的影响

6、枸橼酸钾在临床防治结石中的应用

结 论

参考文献

综述

参考文献

研究生学习期间发表的论文

致谢