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丹参预防雄性大鼠草酸钙结石的实验研究

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引 言

材料与设备

一.实验材料

二.主要实验药品、试剂及来源

三.主要实验仪器、设备

四.主要试剂的配制

实验方法

一.动物实验分组:

二.标本采集:

三.检测指标与检测方法

结 果

讨 论

一、草酸钙结石形成机制

二、丹参对造模后雄性大鼠24h尿草酸及钙的影响

三、丹参对造模后雄性大鼠肾功能的影响

四、丹参对造模后雄性大鼠超氧化物歧化酶 (SOD)及丙二醛(MDA)的影响

五、丹参对造模后雄性大鼠骨桥蛋白(OPN)的影响

六、丹参对造模后雄性大鼠草酸钙结石预防的可能机制

结 论

参考文献

综述

参 考 文 献

攻读学位期间所发表的论文

致谢

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摘要

目的:应用乙二醇和氯化铵,诱导形成大鼠草酸钙结石模型,并且通过检测各组大鼠的24h尿草酸浓度(Ox)、钙离子浓度Ca2+、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、钙离子(Ca2+)、磷(P)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、肾组织的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、肾组织病理及免疫组织化学测定骨桥蛋白(OPN),初步了解丹参对大鼠肾草酸钙结石的预防效果并且探讨其作用机制。
  方法:24只远交群(Sprague Dawley,SD)健康雄性大鼠随机分为3组,每组8只:(1)对照组,实验中正常颗粒饲料及自来水喂养,并腹腔注射等量的生理盐水;(2)诱石组,实验中饮用含1%氯化铵和1%乙二醇溶液的自来水和正常颗粒饲料,并腹腔注射等量的生理盐水;(3)丹参干预组,实验中饮用含1%氯化铵和1%乙二醇溶液的自来水和正常颗粒饲料,并每天腹腔注射丹参注射液2ml/kg/d。2周后,检测各组大鼠的24h尿Ox浓度、Ca2+浓度,血BUN、Cr、Ca2+、P、MDA含量、SOD活力,肾组织的MDA含量、SOD活力含量,肾组织行HE染色,光镜下观察各组肾小管腔内的结石晶体及肾小管扩张情况,免疫组织化学检测各组大鼠肾组织OPN蛋白的表达水平。
  结果:
  1.诱石组和丹参干预组的24h尿Ox浓度,24h尿Ca2+浓度明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);丹参干预组与诱石组比较,24h尿Ox浓度及24h尿Ca2+浓度明显下降,差异也有显著性意义(P<0.05)。
  2.诱石组和丹参干预组的血清BUN、Cr浓度,明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);丹参干预组的血清Cr浓度,明显低于诱石组,差异有显著性意义(P<0.05);丹参干预组的血清BUN浓度与诱石组相比,差异无显著性(P﹥0.05)。
  各组间血清Ca2+、P浓度比较,组间差异无显著性意义(P>0.05)。
  3.诱石组血清及匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性最低,与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05);丹参干预组SOD活性较诱石组高,差异有显著性意义(P<0.05).;与对照组相比,丹参干预组大鼠血清SOD活力降低无显著性意义(P﹥0.05),丹参干预组大鼠匀浆SOD活力降低有显著性意义(P<0.05)。
  4.诱石组血清及匀浆丙二醛(MDA)含量最高,与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05);丹参干预组MDA较诱石组低,差异有显著性意义(P<0.05);与对照组相比,丹参干预组大鼠血清MDA含量明显增高(P<0.05),差异有显著性意义,丹参干预组大鼠匀浆MDA含量增加无显著性意义(P﹥0.05)。
  5.对照组肾小管正常,诱石组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在,管腔明显扩张;丹参干预组肾小管腔可见散在草酸钙结晶存在,少数呈片状,管腔轻度扩张。
  结石晶体评分提示丹参组结石晶体明显较成石组减少,差别有统计学意义(P<0.05)。
  6.免疫组化结果提示,对照组中可检测到OPN蛋白的微弱表达,诱石组大鼠肾组织中OPN表达明显增强。丹参干预组大鼠肾组织中OPN表达强度低于诱石组。
  OPN表达强度评分提示丹参组OPN蛋白表达较成石组减少,差别有统计学意义(P<0.05)。
  结论:
  1.丹参可以使饮用诱石剂大鼠的肾草酸钙结石形成减少。
  2. 丹参可能是通过抗氧化反应,减少自由基对肾小管上皮细胞的损伤,而减少饮用诱石剂大鼠草酸钙结石的形成。
  3. 丹参可能也能够通过降低骨桥蛋白的表达,减少饮用诱石剂大鼠草酸钙结石的形成。

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