肺心汤对低氧性肺动脉高压大鼠模型VEGF、HIF-1α及PHD1表达的影响及作用机理的研究

摘要

背景：低氧性肺动脉高压（HPH）是由低氧引起的肺血管内皮细胞损伤后，血管内皮合成和分泌的各种舒缩因子平衡失调导致早期的肺血管收缩以及后期的肺血管重塑(HPSR)而产生的。HIF-1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖中起重要作用，HIF-1α是HIF-1功能性亚基，调控多种涉及低氧应激下细胞适应与存活的靶基因，从而在低氧应答反应中起核心作用，低氧下 HIF-1α在胞质中大量积累，转移到胞核中与HIF-1β形成异二聚体从而上调 VEGF等多种下流靶基因的表达,VEGF通过诱导细胞增殖和微血管通透性在HPH的发病机制中发挥作用。PHD1促使 HIF-1α脯氨酸残基羟基化并调节其对氧稳定性。肺心汤是我室多年治疗肺心病的经验方，具有选择性降低肺动脉高压作用，但作用机理尚不清楚。
　　目的：探讨肺心汤对 HPH模型大鼠肺小动脉壁及肺组织 VEGF、HIF-1α及PHD1的影响及其治疗HPH的作用。
　　方法：将40只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、肺心汤组和硝苯地平组，每组10只。采用常压间断缺氧法复制 HPH大鼠模型。采用右心导管法测定大鼠平均肺动脉压（mPAP），采用称量法计算右心室肥大指数（RVHI），并进行 HPSR指标观察。免疫组织化学和原位杂交技术分别检测肺小动脉 VEGF、HIF-1α、PHD1蛋白质水平及 mRNA水平表达；免疫印迹技术和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测肺组织 VEGF、HIF-1α、PHD1蛋白质水平及mRNA水平表达。
　　结果：与正常对照组比较，模型组 mPAP、RVHI、WA％、WT%、肺小动脉壁及肺组织 VEGF、HIF-1α蛋白及 mRNA水平表达明显升高(P<0.01)，但PHD1蛋白及 mRNA水平表达明显降低(P<0.01)；与模型组比较，肺心汤组mPAP、RVHI、 WA%及 LA%，肺小动脉壁及肺组织 HIF-1α和 VEGF蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.01)，PHD1蛋白及 mRNA水平表达明显增高(P<0.01)。但未达到正常水平（P<0.01，P<0.05），与对照组比较，硝苯地平组mPAP、RVHI、WA%、LA%、肺小动脉壁及肺组织 VEGF及 HIF-1α蛋白及mRNA水平表达升高(P<0.01，P<0.05)，PHD1蛋白及 mRNA水平表达明显降低(P<0.01)，与模型组比较，硝苯地平组 mPAP降低(P<0.01)，RVHI、WA%及LA%无明显变化（P＞0.05），肺小动脉壁 VEGF蛋白水平表达减低(P<0.05)，VEGF mRNA水平，肺小动脉壁 HIF-1α及 PHD1蛋白及 mRNA水平，肺组织VEGF、HIF-1α及PHD1蛋白及mRNA水平表达无统计学意义（P＞0.05）
　　结论：⑴肺心汤通过降低 HIF-1α的表达而下调其靶基因 VEGF的表达，部分逆转肺血管平滑肌重塑可能是其治疗HPH的作用机制之一。⑵肺心汤可能通过增高PHD1的表达促使HIF-1α降解而治疗HPH。

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主要缩略语

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英文摘要

前言

材料与方法

一.实验材料

二.实验方法

实验结果

1. 肺心汤对各组大鼠mPAP、RVHI及肺小动脉形态学的影响

2. 肺心汤对各组大鼠肺小动脉壁 HIF-1α、VEGF 及 PHD1蛋白表达的影响

3. 肺心汤对大鼠肺小动脉壁HIF-1α、VEGF 及PHD1 mRNA表达的影响

4. 肺心汤对各组大鼠肺组织 HIF-1α、VEGF 及 PHD1蛋白表达的影响

5. 肺心汤对各组大鼠肺组织HIF-1α、VEGF 及PHD1 mRNA表达的影响

讨论

结论

参考文献

附图

综述：活血化瘀法在老年疾病的应用

硕士期间主持/参与的科研项目

硕士期间撰写论文

致谢