姜黄素下调miR-9抑制人结肠癌SW480细胞增殖与迁移的初步研究

摘要

目的：探讨姜黄素调控miR-9（Homo sapiens miR-9）的改变在抑制结肠癌细胞增殖、迁移中的作用及其机制。
　　方法：通过qRT-PCR的方法，分别检测结肠癌细胞株（姜黄素处理组和DMSO对照组）中miR-9的表达水平；采用MTT、细胞划痕法研究姜黄素调控的miR-9促进人结肠癌SW480细胞的生长侵袭能力；运用Western blot方法研究miR-9直接调控的靶基因E-cadherin。
　　结果：MTT结果显示，1、5、10、20μmol/L姜黄素作用结肠癌SW480细胞24h、48h、72h后，与DMSO对照组细胞相比，增殖抑制率分别为21.87％、27.81%与50.79%，29.34%、39.62%与58.38%，37.78%、32.78%与68.37%和44.81%、54.31%与72.35%，表明姜黄素可呈剂量与时间效应抑制SW480细胞增殖(P<0.05)。qRT-PCR结果发现，姜黄素较对照组miR-9表达下调0.64±0.06倍(P<0.05)。转染miR-9抑制剂于SW480细胞12h、24h和48h后，转染组的抑制率分别达40.16%、51.19%与60.56%(P<0.05)。表明下调miR-9可呈时间依赖性抑制SW480细胞的增殖。细胞划痕实验显示，转染miR-9抑制剂24h与48h后，SW480细胞伤口愈合率分别为0.375±0.012和0.556±0.026，明显慢于对照组0.538±0.012和0.803±0.008(P<0.05)。Western blot结果显示，SW480细胞转染miR-9抑制剂24h后，miR-9抑制剂组与miR-9抑制剂+姜黄素组的E-cadherin蛋白表达分别为0.67±0.03与1.12±0.03，较对照组0.33±0.05明显上调(P<0.05)。表明姜黄素可通过下调miR-9，上调E-cadherin表达，抑制结肠癌细胞的增殖与迁移。
　　结论：
　　1.姜黄素可通过下调miR-9表达，抑制结肠癌SW480细胞增殖；
　　2. miR-9可通过下调E-cadherin蛋白表达，促进结肠癌细胞迁移。

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主要缩略词简表

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前言

材料与方法

2.1 材料

2.2 实验方法

结果

3.1 姜黄素对人结肠癌SW480细胞增殖的影响

3.2 姜黄素对miR-9表达的影响

3.3 miR-9对结肠癌SW480细胞增殖的影响

3.4 划痕实验检测miR-9对人结肠癌SW480细胞迁移的影响

3.5 姜黄素可通过miR-9上调其靶基因E-cadherin的表达

讨论

结论

参考文献

综述

参考文献

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