TNF-α、IL-6在实验性急性末端回肠炎中的表达

摘要

目的：探讨TNF-α、IL-6的表达水平在实验性急性末端回肠炎中的变化。
　　方法：选取30只健康成年的雄性杂种犬，运用随机数字抽样法分成6组：正常对照组（A组）、高温高湿高血糖组（B组）、正常血糖颅脑火器伤组（C组）、高血糖颅脑火器伤组（D组）、正常血糖湿热下颅脑火器伤组（E组）、高血糖湿热下颅脑火器伤组（F组），每组5只。将后四组（C、D、E、F组）给予手枪弹颅脑火器伤造模。在实验组（B、C、D、E、F组）共五组造模后，将犬立刻仰卧位固定在手术台上，并行气管插管、心电监护、心肺复苏，观测各组犬生命体征的变化。观察过程中，除心脏挤压及使用球囊呼吸器抢救外，不做其他处理。在无菌条件下，立即开腹，收集距回盲部1-3cm处的末端回肠组织。肉眼大体观察，石蜡包埋后行苏木精-伊红染色法（HE染色）制作病理切片，并在光学显微镜下观察其变化，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测造模后0.5h、1h、3h的TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达水平的变化。
　　结果：
　　1、各组实验犬肛温随时间的变化实验组（B、C、D、E、F组）犬的肛温在各时间点（10min、1h、2h、3h）均有升高，随着时间的推移，肛温逐渐升高，以F组对犬的肛温影响最大，实验组分别与正常组比较，差异有统计学意义（P　　2、末端回肠组织肉眼及镜下炎性评分肉眼观，实验组（B、C、D、E、F组）均以急性炎性反应为表现，且F组较其它组炎性反应严重；病理切片镜下示，实验组炎性细胞浸润增多，淋巴管、乳糜管扩张，绒毛变粗变短，表现为急性炎性反应，实验组分别与正常组比较，差异有统计学意义（P　　3、末端回肠组织 TNF-αmRNA的表达水平各实验组（B、C、D、E、F组）伤后0.5h、1h、3h，TNF-αmRNA在末端回肠组织的表达逐渐升高，以F组升高最大，实验组分别与正常组比较，差异有统计学意义（P　　4、末端回肠组织IL-6mRNA的表达水平伤后0.5h、1h、3h，实验组（B、C、D、E、F组）IL-6mRNA在末端回肠组织的表达依次升高，且随着时间延长，升高数值越大，以F组最明显，实验组分别与正常组比较，差异有统计学意义（P　　结论：
　　1、在实验性ATI中，随着时间的延长，末端回肠组织炎性损伤逐渐加重；
　　2、TNF-α、IL-6在实验性ATI中的表达呈时间依赖性；
　　3、TNF-α、IL-6协同参与了实验性ATI的发病过程。

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主要缩略语英文索引

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英文摘要

前言

实验材料

一、主要试剂

二、主要仪器

实验技术路线图

实验方法

一、动物模型的制作

二、组织的获取与保存

三、病理切片的制作及评分标准

四、RNA的提取

五、以 RNA为模板反转录为 cDNA

六、PCR检测 TNF-αmRNA和 IL-6mRNA的表达

七、统计学处理

实验结果

一、 各组实验犬肛温随时间的变化

二、末端回肠组织肉眼观察、镜下观察及炎性评分

三、实验犬末端回肠组织TNF-αmRNA、IL-6 mRNA表达水平的变化

讨论

一、高温高湿高血糖颅脑火器伤实验犬模型的建立

二、高温高湿高血糖颅脑火器伤环境对犬肛温的影响

三、应激与实验性急性末端回肠炎

四、TNF-α、IL-6在末端回肠组织的表达

结论

参考文献

综述

参考文献：

硕士期间发表的论文

致谢