MUC2、MUC3在实验性急性末端回肠炎中的表达及意义

摘要

目的：探讨MUC2、MUC3在实验性急性末端回肠炎中表达水平的变化及其意义。
　　方法：选取健康成年雄性杂种犬40只，随机分成A（正常对照组）、B（高温高湿高血糖组）、C（常温常湿正常血糖颅脑火器伤组）、D（常温常湿高血糖颅脑火器伤组）、E（高温高湿正常血糖颅脑火器伤组）、F（高温高湿高血糖颅脑火器伤组）、G（常温常湿高血糖组）、H（高温高湿正常血糖组）8组，每组5只。于实验前30min分别测量并记录各组实验犬的肛温、心率、呼吸频率等生命体征。实验开始时对各实验犬予以陆眠宁（0.08ml/kg）肌注麻醉，A、B、G、H组不予以特殊处理；C、台上（仰卧位），立即行气管插管、心肺复苏等抢救，并密切监测实验犬伤后肛温、心率等生命体征；除胸外心脏按压及人工气囊辅助呼吸外，不行其他额外措施。如上维持2h后在无菌条件下行腹部切开，获得实验犬末端回肠组织（取距回盲瓣约5cm处）。将所取组织进行肉眼观察后予石蜡包埋，部分组织用苏木精-伊红染色法（HE染色）制作病理切片，并在光学显微镜下观察其变化，另一部分组织采用常规SP免疫组化方法检测实验犬造模后末端回肠组织中MUC2、MUC3的表达水平。D、E、F组分别予以颅脑火器伤处理。然后将各实验犬固定于无菌手术
　　结果：
　　1、各组实验犬实验前后生命体征的变化实验前0.5h各组实验犬生命体征平稳，B、C、D、E、F、G、H组与A组（正常对照组）比较，
　　G、C、D组心率与A组比较差异无统计学意义（P>0.05），B、E、F、H组心率与A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。肛温、心率差异均无统计学意义（P>0.05）。1h后，B、C、G、H组肛温与A组比较，差异无统计学意义（P>0.05），D、E、F组肛温与A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；C、D、G、H组与A组比较，心率差异无统计学意义（P>0.05），B、E、F组心率与A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。2h后，B、G、H组肛温与A组比较，差异无统计学意义（P>0.05），C、D、E、F组肛温与A组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；
　　2、末端回肠组织肉眼观查及HE染色光镜下观察结果肉眼观察，A、G、H组未见明显炎症改变，B、C、D、E、F组均有不同程度急性炎症性改变，且F组最为严重。HE染色光镜下观察，A、G、H组无明显炎性改变，B、C、D、E、F组均有不同程度的炎性细胞浸润，淋巴管、乳糜管扩张，绒毛变粗变短，表现为急性炎性反应。两种观察方法炎性评分比较说明颅脑火器伤及高温高湿对末端回肠组织炎症程度有影响，高血糖对末端回肠组织炎症程度影响不明确，炎性损伤程度随着高温高湿高血糖颅脑火器伤因素的叠加而逐渐加重。
　　3、末端回肠组织 MUC2的表达水平 MUC2阳性表达表现为棕黄色颗粒状着色广泛分布于杯状细胞胞浆，以核周及核膜明显,少数呈弥漫性胞质阳性,细胞核不着色。各实验组末端回肠组织MUC2表达的平均光密度值，与A组比较差异均有统计学意义（P<0.05）；组间MUC2表达的平均光密度值比较说明颅脑火器伤及高温高湿对MUC2的表达有影响，而高血糖对 MUC2表达的影响不明确。MUC2的表达与末端回肠组织的炎症程度呈负相关关系。
　　4、末端回肠组织 MUC3的表达水平 MUC3阳性表达表现为棕黄色颗粒状着色广泛分布于杯状细胞和柱状细胞胞浆中，细胞核不着色。B、C、D、E、F、H组与A组比较差异均有统计学意义（P<0.05），G组与A组比较差异无统计学意义（P>0.05）；组间MUC3表达的平均光密度值比较说明颅脑火器伤及高温高湿条件对MUC3的表达有影响，高血糖对MUC3表达的影响不明确。MUC3的表达与末端回肠组织的炎症程度呈正相关关系。
　　结论：
　　1．颅脑火器伤能引起末端回肠组织的炎性改变，炎性损伤程度随着高温高湿、高血糖条件的叠加而加重；
　　2．末端回肠组织粘膜中 MUC2的表达下调及 MUC3的表达上调与 ATI炎症损伤程度相关，粘蛋白的分泌可能参与了实验性ATI的致病过程。

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英文缩略词表

绪论

实验材料

1. 主要实验仪器及耗材

2. 主要实验试剂

实验技术路线图

实验方法

一、实验动物模型的建立

二、组织的获取与保存

三、病理切片的制作及评分标准

四、统计学处理

实验结果

一、各组实验犬实验前后生命体征的变化

二、各组实验犬末端回肠组织炎性评分

三、各组实验犬末端回肠组织MUC2及MUC3的表达

讨论

一、应激因素的设定及实验犬模型的建立

二、各应激因素对实验犬生命体征的影响

三、实验犬末端回肠组织的炎性改变

四、实验犬末端回肠组织中MUC2及MUC3的表达

结论

参考文献

综述:应激对肠道屏障功能的影响

硕士期间发表的论文

致谢