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肾性高血压大鼠经历寒潮发生卒中前血清中vWF与IL-6的表达研究

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主要英文缩略语表

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前言

材料和方法

1 实验材料

1.1 主要试剂

1.2 主要设备

1.3 主要溶液配制

1.4 组织石蜡包埋的流程

1.5 苏木素-伊红染色流程

1.6 实验动物

2. 方法

2.1 技术路线2.2 RHRSP模型制备

2.3 血压测量

2.4 高血压模型制备成功的判断标准

2.5 Longa评分标准

2.6 模拟人工寒潮

2.7 标本采集

2.8 大鼠血清vWF含量的检测

2.9 大鼠血清IL-6含量的检测

3.统计学分析:

4. 结果

4.1 大鼠的一般情况

4.2血压情况

4.3卒中情况及病理变化

4.4寒潮前血清中vWF含量的比较

4.5寒潮前血清中IL-6含量的比较

4.6 收缩压(SBP)、血清vWF的含量和血清IL-6的含量之间的散点图及相关性分析

5.讨论

6结论

参考文献

大鼠脑缺血模型的制备和影响因素

参考文献

附录1:

附录2.攻读硕士研究生期间发表的文章

致谢

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摘要

目的:研究易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)经历人工寒潮后发生卒中的情况并检测人工寒潮前血清中血管性假血友病因子(vWF)和白介素-6(IL-6)的含量,初步探讨人工寒潮对 RHRSP发生卒中的影响及 RHRSP发生卒中前血清中vWF与IL-6的表达情况与卒中的关系。
  方法:健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠共250只,随机分成两组:RHRSP组、假手术组。200只大鼠按双肾双夹法复制成RHRSP模型,50只做假手术组。用鼠尾测压仪(HX-1型)经尾动脉测量收缩压的方法于术前测量血压1次,术后每4周测量1次。饲养12周后,将两组大鼠置于人工气候箱中,温度设置以22℃12小时,4℃12小时为1天循环,共3天,然后处死,并进行灌注固定,病理检查。并根据镜检结果把 RHRSP组分为高血压非卒中组,脑梗死组,脑出血组。大鼠在放入寒潮箱前舌下静脉取血约1.5ml。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中vWF和IL-6的含量。
  结果:脑卒中结果:假手术组经历人工寒潮后未出现脑卒中,RHRSP组有11只发生脑梗死,有36只发生脑出血,其卒中率为24.7%。各组之间血压的比较:高血压非卒中组﹑脑梗死组﹑脑出血组三组寒潮前的收缩压(SBP)分别为170±20 mm Hg,210±19 mm Hg,213±21 mm Hg。假手术组寒潮前的收缩压(SBP)为112±12 mm Hg。RHRSP三组的血压明显高于假手术组(P<0.001,P<0.001,P<0.001);脑梗死组和脑出血组的血压明显高于高血压非卒中组(P<0.01,P<0.01);而脑梗死组和脑出血组无明显差异(P>0.05)。各组之间vWF的比较:高血压非卒中组﹑脑梗死组﹑脑出血组三组寒潮前血中vWF含量分别为180.6±21.9 pg/ml,225.3±20.1 pg/ml,219.1±24.8 pg/ml。假手术组寒潮前vWF的含量为100.5±23.2 pg/ml。RHRSP三组的vWF含量明显高于假手术组(P<0.001,P<0.001,P<0.001);其中脑梗死组和脑出血组的含量明显高于高血压非卒中组(P<0.01,P<0.01);而脑梗死组和脑出血组无明显差异(P>0.05)。各组之间IL-6的比较:高血压非卒中组﹑脑梗死组﹑脑出血组三组寒潮前血中IL-6含量分别为174.5±27.5 pg/ml,245.4±22.7 pg/ml,230.8±24.2 pg/ml。假手术组寒潮前血中IL-6的含量为115.9±28.5 pg/ml。RHRSP三组的IL-6含量明显高于假手术组(P<0.001,P<0.001,P<0.001); IL-6在脑梗死组的含量明显高于高血压非卒中组(P<0.01);脑出血组的含量也明显高于高血压非卒中组(P<0.01);而脑梗死组和脑出血组无明显差异(P>0.05)。各组寒潮前收缩压(SBP)、血清vWF的含量和血清IL-6的含量之间相关性分析:经直线相关分析表明,各组大鼠寒潮前血压与血清vWF的含量呈显著正相关(r=0.728,P<0.001);各组大鼠寒潮前血压与血清IL-6的含量呈显著正相关(r=0.745,P<0.001);血清vWF的含量与血清IL-6的含量呈显著正相关(r=0.821,P<0.001)。
  结论:1 RHRSP血中的vWF与IL-6升高,且随血压的升高而升高。2发生脑卒中的RHRSP寒潮前血中vWF与IL-6的含量明显升高,说明vWF与IL-6的变化可以反应出卒中前状态的存在。

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