盐霉素对前列腺癌PC-3细胞及其干细胞体外抑制作用机制研究

摘要

目的：观察盐霉素对前列腺癌PC-3细胞及其干细胞体外增殖的影响和对肿瘤干细胞基因表达的影响；初步探讨盐霉素体外作用于前列腺癌PC-3肿瘤干细胞的可能机制。
　　方法：1、用含160、80、40ug/ml等10个不同浓度的盐霉素作用前列腺癌PC-3肿瘤细胞，以紫杉醇阳性对照，MTT法检测出半效浓度（IC50，μg/ml）及最大抑制率（Imax）并绘制肿瘤细胞生长曲线；2、将对数生长期的前列腺癌 PC-3细胞分为空白对照组、溶媒对照组与实验组，盐霉素作用24小时后,以“CD133+、CD44+”双阳性细胞作为肿瘤干细胞，通过流式细胞仪进行干细胞比例分析并分选；3、提取每组肿瘤干细胞总的RNA，用micorarray技术对各组基因表达进行分析，找出表达差异2倍、10倍及以上的基因，并进行统计学分析。
　　结果：（1）、测得盐霉素对前列腺癌 PC-3细胞的IC50为9.18±6.66 ug/ml，Imax=99.35％；（2）、流式细胞仪分析结果显示空白对照组肿瘤干细胞比例均值为0.83%，溶媒组肿瘤干细胞比例均值为0.81%，实验组肿瘤干细胞比例均值为0.46%，通过两样本均数t检验，空白对照组与实验组之间差异具有统计学意义（p＜0.05），而空白对照组与溶媒组之间差异不具统计学意义（p＞0.05）；（3）、micorarray分析结果显示，上调2倍基因1574个，下调2倍基因1666个，上调10倍及以上的基因有26个，下调10倍及以上的基因有21个，其中与肿瘤干细胞凋亡、生长以及肿瘤耐药等生物学特性相关的基因为FOLR1、CYP3A4、THBS1、MIER1、ATP2A3、LAMA4。
　　结论：
　　(1)盐霉素在体外能有效抑制前列腺癌PC-3细胞增殖；
　　(2)盐霉素对前列腺癌PC-3肿瘤干细胞有选择性杀伤、抑制作用；
　　(3)盐霉素可能通过上调ATP2A3和下调LAMA4基因的表达来诱导肿瘤细胞凋亡，从而达到抗肿瘤干细胞的作用。

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1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 讨论

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