5,4’-二-正辛烷氧基-7-二氟甲氧基金雀异黄素对肺癌A549细胞生长和凋亡的影响

摘要

目的:研究5,4’-二-正辛烷氧基-7-二氟甲氧基金雀异黄素(DFOG)对体外培养人肺癌A549细胞生长和凋亡的影响，并探讨其作用机制。
　　方法:体外培养肺癌A549细胞，MTT比色法测定细胞活性。平皿集落形成法检测细胞集落形成能力。碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析细胞周期分布和凋亡率；酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞组蛋白/DNA碎片水平。Western Blot检测细胞Mcl-1蛋白表达。
　　结果:MTT比色法测定结果表明，DFOG(0.1、0.3、1.0、3.0、10.0、30.0μmol/L)作用24 h，肺癌A549细胞活性随药物浓度增高逐次降低；其对细胞活性抑制的IC50值为3.9±1.2μmol/L。平皿集落形成法检测结果显示，DFOG(2.0、4.0、8.0μmol/L)以剂量依赖方式抑制肺癌 A549细胞锚定依赖性生长能力。PI染色FCM分析结果证明，DFOG(2.0、4.0、8.0μmol/L)处理24 h导致肺癌A549细胞系G2期细胞百分率显著增加，同时，伴有G1和S期细胞百分率减少；并促进细胞凋亡率(Sub-G1细胞百分率)增高。ELISA测定结果证实，DFOG(2.0、4.0、8.0μmol/L处理24 h，肺癌A549细胞组蛋白/DNA碎片水平随药物浓度增高依次增加DFOG。WesternBlot分析发现，2.0μmol/L DFOG分别处理0 h、6 h、12 h和24 h，肺癌A549细胞Mcl-1蛋白表达下调，呈时间依赖性。
　　结论:
　　1. DFOG具有抑制肺癌A549细胞活性和生长作用，呈浓度依耐性。
　　2. DFOG能有效诱导肺癌A549细胞凋亡，呈浓度依耐性。
　　3. DFOG诱导肺癌A54细胞凋亡作用可能与其下调细胞Mcl-1蛋白表达有关。

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前言

材料与方法

1 材料

1.1 细胞与细胞培养

1.2 受试物与试剂

1.3仪器设备

2 方法

2. 1 试剂配制

2. 2 MTT比色法

2. 3 平皿集落形成法

2. 4 PI染色FCM分析

2. 5组蛋白/DNA碎片的含量测定

2. 6 Western Blot分析

2. 7 统计学分析

实 验 结 果

1 DFOG对肺癌A549细胞活性的影响

2 DFOG对肺癌A549细胞锚定依赖性生长的影响

3 DFOG对肺癌A549细胞周期分布的影响

4 DFOG对肺癌A549细胞凋亡率的影响

5 DFOG对肺癌A549细胞组蛋白/DNA碎片水平的影响

6 DFOG对肺癌A549细胞Mcl-1蛋白表达的影响

讨论

结论

参考文献

综述

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