单中心连续100例肺癌术后EGFR基因突变检测结果分析

摘要

目的:收集单中心连续100例肺癌根治术后患者的组织病理标本，进行EGFR基因突变检测。本研究探讨原发性支气管肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变特点（突变位点及频率），及其与临床特征（病理类型、性别、吸烟情况、临床分期、分化程度）的关系。
　　方法:收集湖南省肿瘤医院胸外二科连续100例原发性支气管肺癌住院患者的手术标本，经福尔马林溶液固定及石蜡包埋后，切取10-15片石蜡包埋白片。依据顺序流程采用二甲苯及不同浓度梯度的乙醇溶液脱蜡。按QIAamp DNA FFPE Tissue试剂盒的说明书步骤进行DNA提取。B-500超微量分光光度计测定DNA纯度，依A260/A280＞1.8的标准进行样本质控。采用EGFR基因突变检测试剂盒对样本的EGFR18、19、20、21号外显子进行PCR扩增并测序。测序采用PyroMark Q24焦磷酸测序仪进行。将测得的序列与Genbank中EGFR基因野生型标准序列进行对比。确定突变位点及位点突变频率后，将所得结果进行汇总，并用卡方检验对突变与临床特征的关系进行统计学分析。P＜0.05有统计学意义。
　　结果:100例中检测到EGFR基因突变33例（33％，33/100)，其中外显子19号位突变19例；外显子21号位突变14例，未检测到其他位点突变患者。腺癌突变32例（47.76%，32/67）；鳞癌突变1例（4.17%，1/24）；其余病理类型均未检测到突变。男性突变率为16.39%(10/61），女性突变率为58.97%（23/39），χ2检验发现不同性别的突变率差异有统计学意义（P=0.000013＜0.05）；既往吸烟的患者突变9例（15.52%，9/58）， 不吸烟者突变24例（57.14%，24/42），吸烟组与不吸烟组的突变率有统计学差异（P=0.000015＜0.05）；女性不吸烟腺癌患者有22例发生突变（70.97%，22/31）。临床分期I、II、III、IV期突变率分别为41.30%（19/46）、26.32%（5/19）、20.83%（5/24）、57.14%（4/7）。分化程度上，高分化、高中分化、中分化、中低分化、低分化突变率分别为57.14%（4/7）、55.00%（11/20）、32.35%（11/34）、14.29%（3/21）、28.57%（4/14）。
　　结论: EGFR突变主要集中在外显子19和21号位，EGFR基因突变与病理类型、性别和吸烟史相关，与临床分期无关，与病理分化程度似可见相关性。揭示EGFR基因突变特点以及与临床特征的关系有助于在临床中推荐可能出现EGFR突变患者进行基因检测，使这部分患者有可能在TKI靶向药物中获益。

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第1章 引 言

第2章 材料与方法

2.1 标本收集与临床资料统计

2.2 实验步骤

2.3 统计学分析

第3章 结 果

3.1 病例临床特征

3.2 EGFR基因突变特点

3.3 EGFR基因突变与临床特征的关系

第4章 讨 论

第5章 结 论

参考文献

第6章 综 述:EGFR-TKI术前新辅助靶向治疗

攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢