系统性红斑狼疮病人血浆miRNAs差异表达谱研究

摘要

目的：通过基因芯片技术获得系统性红斑狼疮病人和健康人血浆中miRNA差异表达谱，以获得用于诊断和治疗系统性红斑狼疮的分子标记物。
　　方法：收集18例系统性红斑狼疮病人和10例健康人的血浆标本，分别提取总RNA；采用miRNA基因芯片技术检测统性红斑狼疮病人和健康人血浆中差异表达的miRNA；选取表达差异最大两个miRNAs，通过qRT-PCR技术检其表达水平，并与基因芯片结果进行对比，分析这两个miRNAs在系统性红斑狼疮的发生发展中的作用。通过生物信息学方法分析这两个miRNAs所分别调控的靶基因和信号通路。
　　结果：
　　1.获得系统性红斑狼疮病人的miRNA差异表达谱。SLE病人血浆中有35个miRNAs表达上调，上调倍数最大的为miR-21，上调26.1235倍；有14个miRNAs表达下调，下调倍数最大的为miR-146a，下调0.0512倍。
　　2.18例SLE病人中，miR-21的相对平均值为33.5±2.2，10例健康人中，miR-21的相对平均值为2.8±0.5，上调倍数为11.9642倍；18例SLE病人中，miR-146a的相对平均值为1.3±0.1，10例健康人中，miR-146a的相对平均值为5.7±1.3，下调倍数为0.2281倍。
　　3. miR-21、miR-146a在qRT-PCR检测中的结果与基因芯片中的表达趋势一致，说明基因芯片结果是可靠的。
　　4.生物信息学分析发现，miR-21调控的靶基因有307个，涉及到的信号通路主要有：EGF、TGF-beta、MAPK、Jak-STAT、神经营养因子信号通路等；miR-146a调控的靶基因有224个，涉及到的信号通路主要有：MAPK、Notch、Fas信号通路等。
　　结论：
　　1.获得了SLE病人的miRNAs差异表达谱，在SLE血浆中，上调的miRNAs有35个，下调的miRNAs有14个。
　　2. SLE病人中，上调倍数最大的为miR-21；下调倍数最大的为miR-146a，两者RT-PCR检测结果与基因芯片结果一致。
　　3. miR-21和miR-146a可能在SLE发生发展中具有重要作用。

目录

声明

主要缩略英文索引

第一章 引 言

1.1 系统性红斑狼疮发病与研究现状

1.2 miRNA与系统性红斑狼疮

1.3 miRNA芯片检测技术

1.4 研究内容

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.2 实验方法

第3章结果

3.1 总RNA质量合格判断

3.2 基因芯片扫描结果

3.3 基因芯片检测到的差异表达miRNAs

3.4 miRNAs差异表达谱的聚类分析(Cluster)

3.5 qRT-PCR检测miR-21，miR-146a表达水平

3.6 miR-21和miR-146a生物信息学分析

第4章 讨论

4.1 SLE研究现状

4.2 SLE与miRNA研究进展

4.3 生物信息学分析基因芯片结果

第5章 结论

参考文献

综述:自身免疫性疾病发病机理中miRNA的作用

在读期间发表的论文

致谢