新城疫疫苗对鸡T淋巴细胞发育及其免疫功能发生的影响

摘要

本研究选择了SPF18日鸡胚及出壳后1、4、7、14、28、56、84、120日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒Lasota活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第10天剖杀，采取胸腺、脾脏，制作冰冻切片，进行HE染色和免疫组化染色；无菌采取胸腺、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验(MTT法)。对不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后中枢免疫器官胸腺和外周免疫器官脾脏的组织发生过程、T淋巴细胞及其亚群的动态变化和T淋巴细胞增殖反应及其IL-2诱生的动态变化进行测定。旨在全面系统的揭示不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾脏中T淋巴细胞发育及其免疫功能发生的变化规律。研究结果发现： 利用HE染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾脏的组织结构发现：SPF对照组鸡胸腺7日龄时胸腺小叶皮质和髓质分界鲜明。随着日龄的增加，胸腺小叶增多、增大，髓质比例增大，胸腺小体增多，髓质出现融合。94日龄时胸腺各小叶间髓质部连接在一起，形成较大的片状结构，分布面积较大，同时髓质中的胸腺小体数量和上皮细胞逐渐明显增多。130日龄胸腺皮质开始变薄，小叶结缔组织的脂肪细胞侵入胸腺实质，总体说明胸腺开始趋于退化。与对照组比较，免疫组鸡胸腺在不同日龄较同日龄对照组无明显差异。SPF对照组鸡脾脏7日龄时，白髓和红髓分界清楚，未见脾小体。14日龄时形成了脾小体。随着日龄的增大，脾脏中动脉周围淋巴鞘数目增多、脾小体增多增大。130日龄时，动脉周围淋巴鞘面积呈下降趋势。与对照组比较，免疫组各日龄动脉周围淋巴鞘和脾小体数目和面积显著增多和增大，其他均与对照组无显著差异。结果表明，SPF对照组鸡随着日龄的增长，胸腺和脾脏的发育逐渐完善，免疫能力不断增强。不同日龄鸡Lasota疫苗免疫后胸腺的组织发育不受影响，而脾脏组织结构发生变化，以增强机体的免疫功能。 利用免疫组织化学技术结合计算机图像分析技术研究不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾脏中T淋巴细胞及其亚群的动态变化发现：SPF对照组鸡随着日龄的增加，胸腺和脾脏中CD3+、CD4+、CD8+T细胞总体呈现增长趋势。与对照组比较，免疫组胸腺CD3+、CD4+、CD8+T细胞均有上升趋势，但统计学上差异不显著。免疫组脾脏中CD3+和CD4+T细胞均不同程度地高于对照组，而CD8+T细胞均明显降低(P<0.05)。结果表明，SPF对照组鸡随着日龄的增长，胸腺和脾脏中CD3+、CD4+、CD8+T细胞总体呈现增长趋势，并呈现出一定的年龄相关性变化。不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后，对胸腺中T细胞的数量影响不大，而对脾脏能够引起T细胞及其亚群的变化，这样的变化更有利于细胞的激活，抗体的产生和细胞因子的释放。 利用MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后胸腺和脾脏中T淋巴细胞增殖反应及IL-2诱生活性的动态变化发现：SPF对照组鸡从14日龄时，胸腺和脾脏中的T淋巴细胞开始具有增殖功能，并且此后随着日龄的增加增殖功能逐渐增强，直到56日龄时达到最大值，94日龄时下降并趋向于稳定。与对照组比较，免疫组鸡胸腺和脾脏中T淋巴细胞增殖反应和IL-2诱生活性均呈现增长趋势。结果表明，不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后均能够提高机体的细胞免疫功能，且随着年龄的增加而增强，呈现一定的年龄相关性变化。 上述研究结果首次从组织水平、细胞水平和分子水平对不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后T淋巴细胞发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫新城疫Lasota疫苗后对胸腺的组织结构发生和T淋巴细胞发育没有影响，而能够促进脾脏的组织发育，T淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，均表现为年龄相关性的变化，为进一步探索新城疫疫苗对T细胞引起的细胞免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

1.1研究目的和意义

1.2国内外研究现状

1.2.1禽类免疫系统的特点

1.2.2家禽T细胞

1.2.3新城疫免疫研究进展

1.3研究内容和方法

第二章新城疫(ND)疫苗对鸡T淋巴细胞发育的影响

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果

2.2.1不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后胸腺组织结构的动态变化

2.2.2不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后胸腺中T淋巴细胞及其亚群的动态变化

2.2.3不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后脾脏组织结构的动态变化

2.2.4不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后脾脏中T淋巴细胞及其亚群的动态变化

2.3讨论

2.3.1不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后免疫器官组织结构动态变化

2.3.2不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后胸腺中T淋巴细胞及其亚群动态变化

2.3.3不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后脾脏中T淋巴细胞及其亚群动态变化

第三章新城疫(ND)疫苗对鸡T淋巴细胞免疫功能发生的影响

3.1材料和方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果

3.2.1不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后免疫器官T淋巴细胞增殖反应变化

3.2.2不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后免疫器官IL-2诱生活性变化

3.3讨论

3.3.1不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后T淋巴细胞增殖反应

3.3.2不同日龄鸡免疫Lasota疫苗后IL-2诱生活性变化

第四章结论

参考文献

致谢

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