运动心脏重塑过程中大鼠心房肌的比较蛋白质组学研究

摘要

目的：本研究运用生命科学领域中前沿的比较蛋白质组学理论、方法与技术，探讨在运动心脏重塑过程中心房肌蛋白质组差异性表达的动态变化，筛选出有意义的心房肌目标蛋白质，全面、系统的诠释运动心脏的发生、发展规律，为研究运动心脏及慢性心血管疾病的运动康复提供实验依据和新的思路与方法。 方法：以54只雄性SD大鼠为研究对象，按体重随机分为6组，其中实验组3组(分为4周、8周与12周运动组)，对照组3组(分为4周、8周和12周平行对照组)，实验组采用12周中等强度(70～80％VO2max)递增运动负荷跑台训练构建运动心脏实验动物模型，分别于运动4、8、12周后与平行对照组同时麻醉处死，计量心重量，提取心房肌蛋白样品，采用双向凝胶电泳技术建立实验组与对照组蛋白质组的差异性表达图谱；选择运动后差异表达量≥10倍的蛋白质点作为备选的目标蛋白质，采用串联飞行时间质谱仪进行肽质量指纹分析后，选取一级质谱图上峰值较高的肽段进行二级质谱确证。 结果与结论：经4、8、12周运动后，与对照组相比实验组心脏重量指数分别增加18.5％、34.5％与36.6％，均具有显著性差异(p<0.05)，出现运动心脏的形态学变化。在实验组心房肌蛋白质差异表达量变化≥10倍的38个蛋白质点中，经质谱鉴定、确证3个备选的目标蛋白质点。心钠素前体为4周实验组表达量上调10倍的蛋白质，其表达量的升高提示：可能与抑制心肌细胞的过度生长及血压的调节有关：热休克蛋白β2和热休克蛋白60为12周实验组表达量分别上调50和100倍的点，均属于热休克蛋白家族，它们表达量升高提示：长期中等强度的耐力运动有利于心肌细胞保护和增强心肌功能，预防心肌在各种应激情况下的损伤。且热休克蛋白还可能直接参与心肌肥大的发生。在运动心脏的发生过程中，大鼠心房肌蛋白质组发生的差异性变化与心脏形态、结构的重塑及其调节、心房内分泌、心血管系统功能的改善及应激的适应有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表(中英文对照)

声明

1前言

2材料与方法

2.1实验对象与分组

2.2实验动物建模方式

2.3仪器设备和试剂

2.4样品制备

2.5固相PH梯度-SDS双向凝胶电泳方法与图像分析

2.6质谱分析

2.7质量控制

2.8实验数据的统计学分析

3实验结果

3.1心脏形态学变化

3.2心房肌蛋白质组的定量分析

3.3质谱鉴定结果

4分析与讨论

4.1中等强度耐力运动对心脏形态学的影响

4.2心房蛋白质组的差异表达

4.3目标蛋白质分析

5结论

参考文献

专题综述：运动心脏重塑的调节

科研情况

致谢