人参皂苷Re对小鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的雌激素样作用

摘要

目的:究人参皂苷Re(GS-Re)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)体外增殖的作用及其可能机制研,为研发MSC增殖失调相关性疾病的有效药物提供实验证据。
　　 方法:采用小鼠骨髓原代MSC集落形成实验、MSC传代纯化细胞计数和MTT比色实验,观察GS-Re、-Rg1、-Rh1和ppt对MSC谱系细胞体外增殖的影响。进行MSC传代纯化细胞培养,设置GS-Re组、GS-Re+ICI182780(雌激素受体拮抗剂)组、雌二醇组、雌二醇+ICI182780组、ICI182780组和正常培养对照组,观察人参皂苷-Re对MSC增殖的雌激素样作用,并采用BrdU掺入法、流式细胞周期分析和Western blot探索其作用机制。
　　 结果:在5～20μmol/L范围内,各浓度GS-Re组和GS-Rg1组的MSC集落产率和MSC传代细胞计数高于对照组。与对照组相比,1～20μmol/L浓度范围内各GS-Re组MSC传代扩增细胞的MTT吸光值均显著增高,5～20μmol/L范围内各GS-Rg1浓度组的MTT吸光值也显著增高。GS-Re和GS-Rg1对MSC集落产率、MSC传代细胞计数和MTT吸光值的影响均呈现明显的量效关系,而且,GS-Re的作用更强。在0.5～20μmol/L范围内,各浓度GS-Rh1组和ppt组与对照组之间上述实验指标的差异都无显著性意义。在201μmol/L GS-Re和10-8μmol/L雌二醇的培养体系中分别加入10-6mol/L的ICI182780后,MSC集落产率和平均面积均显著减低。MSC传代纯化细胞培养体系中20μmol/L的GS-Re和10-8μmol/L的雌二醇能提高BrdU掺入阳性细胞百分率,ICI182780加入体系则能抵消这种效应。与对照组相比,Re组和雌二醇组MSC传代扩增细胞的G0/G1期百分比均降低,而G2/M期百分比均增高；雌二醇组细胞的S期百分比也增高。ICI182780能抑制GS-Re和雌二醇对MSC传代扩增细胞分裂周期的影响。与对照组比,Re组和雌二醇组MSC传代细胞的ERK1/2蛋白含量均增加,ICI182780能抑制GS-Re和E2对ERK1/2表达的上调。
　　 结论:在一定浓度范围内,GS-Re、GS-Rg1能促进小鼠骨髓MSC的体外增殖,而GS-Rh1和ppt对这种细胞的体外增殖无显著影响。GS-Re促进MSC体外增殖的作用机制至少包含加速细胞周期的运转和加速DNA合成,其信号转导可能与雌激素受体介导途径及MAPK-ERK1/2通路有关。

目录

文摘

英文文摘

主要缩略词

1.研究背景综述

1.1 人参皂苷的研究进展

1.2 骨髓MSC的生物活性研究进展

1.3 人参皂苷对骨质疏松症可能具有防治效果

1.4 人参皂苷促进MSC增殖的研究

1.5 本研究的目的和意义

2.实验研究

2.1 材料与方法

2.2 结果

2.3 讨论

参考文献

附1

攻读学位期间发表论文情况

致谢