NADPH氧化酶p47phox亚基在鼠衣原体生殖道感染和致病中的作用研究

摘要

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，Ct)是一类专性细胞内寄生的病原微生物。它常引起沙眼，也是主要的性病病原体之一。Ct感染女性生殖道后主要引起子宫内膜炎、宫颈炎和输卵管炎等疾病，而且会导致异位妊娠和输卵管相关的不孕不育等并发症。目前Ct的致病机理仍不清楚，也没有有效的疫苗上市。因为Ct感染小鼠后，只能引起轻微的病理变化，而鼠衣原体(Chlamydia muridarum，Cm)感染小鼠后引起的症状与人下生殖道感染相似，通常采用Cm感染小鼠的模型来研究衣原体的感染和致病机理。
　　本文研究了NADPH氧化酶在鼠衣原体感染和致病过程中所起的作用。中性粒细胞基质因子1（neutrophil cytosolic factor1，NCF1）基因编码的p47phox亚基是NADPH氧化酶的关键亚基，该亚基的缺失会严重影响NADPH氧化酶的功能。为研究NADPH氧化酶对衣原体下生殖道感染和致病的影响，我们用鼠衣原体经阴道感染p47phox缺陷型和野生型小鼠，定期检测小鼠下生殖道中衣原体的数量。在感染后期，处死小鼠，分离小鼠泌尿生殖道。肉眼观察小鼠生殖道的子宫角积水扩张和输卵积水扩张的情况。将小鼠的泌尿生殖道制成组织切片，在显微镜下观察病变情况，并对各种炎症细胞进行计数。为研究NADPH氧化酶对衣原体上行感染的影响，用Cm经阴道感染缺陷型和野生型小鼠，在感染早期处死小鼠，将生殖道组织分段，匀浆，检测生殖道各部分中衣原体的数量。
　　本文发现，感染后的缺陷型与野生型小鼠下生殖道分泌物中衣原体的数量相当。两组小鼠子宫角积水扩张程度没有明显差异，但缺陷型小鼠不能形成明显的输卵管积水扩张。显微镜下观察发现，缺陷型小鼠输卵管中单核细胞浸润明显少于野生型小鼠。感染早期，两组小鼠上生殖道中衣原体的数目相当。结果表明，NADPH氧化酶在鼠衣原体诱导的输卵管炎症反应和病理变化中起重要作用，但小鼠的子宫角积水扩张不依赖于NADPH氧化酶的作用。小鼠控制衣原体下生殖道感染和上行感染也不依赖于NADPH氧化酶的作用。这为研究衣原体在人体内的感染和致病机理提供了理论基础。
　　除了上述研究，本论文还研究了小鼠经Cm阴道感染后形成子宫角扩张的病理基础。我们发现子宫内膜中腺管的向外扩张会导致子宫角管腔的堵塞，这可能进一步导致了子宫角的扩张。子宫角扩张的严重程度与子宫内膜中发生扩张的腺管的数目有显著相关性。Cm经阴道感染后，确实能够上行到子宫角，并感染了其中的腺管。这揭示了Cm感染引起的子宫内膜腺管扩张可能是导致子宫角扩张的主要原因。

目录

摘要

第一章 前言

1．沙眼衣原体

1．1 沙眼衣原体简介

1．2 沙眼衣原体的生活周期

2．衣原体研究的常用动物模型

2．1 小鼠模型

2．2 豚鼠模型

2．3 猪模型

2．4 灵长类动物模型

2．5 基因敲除小鼠在衣原体感染和致病机理研究中的应用

3．中性粒细胞在抗微生物感染中的作用

4．吞噬细胞NADPH氧化酶在感染过程中的作用

5．子宫角扩张

第二章 NADPH氧化酶p47phox亚基在鼠衣原体生殖道感染中的作用研究

1．引言

2．材料与方法

2．1 实验小鼠、衣原体菌株及细胞株

2．2 主要实验试剂

2．3 主要实验仪器

2．4 主要实验方法

2．5 数据统计

3．实验结果

3．1 p47phox缺陷对衣原体感染引起的上生殖道病理反应的影响

3．2 p47phox缺陷型和野生型小鼠上生殖道显微镜下病理评分

3．3 p47phox缺陷对生殖道衣原体清除速度的影响

3．4 p47phox缺陷对衣原体上行感染的影响

3．5 NCF1缺失对衣原体感染引起的长期炎性细胞浸润的影响

4．讨论

第三章 鼠衣原体感染导致的小鼠子宫角腺管扩张

1．引言

2．材料方法

2．1 实验小鼠、衣原体菌株及细胞株

2．2 主要实验试剂

2．3 主要实验仪器

2．4 主要实验方法

2．5 数据统计

3．实验结果

3．1 Cm感染引起的子宫角腺管扩张的情况

3．2 Cm感染引起小鼠子宫角扩张的病理基础

3．3 子宫角腺管扩张和子宫角扩张的相关性

3．4 Cm感染小鼠子宫角腺管的情况

4．讨论

结语

参考文献

读研期间文章发表和录用情况

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致谢

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