大鼠动脉粥样硬化模型TLR6的表达及瑞舒伐他汀干预后的影响研究

摘要

目的:
　　本实验采用SD(Sprague dawley)大鼠动脉粥样硬化模型，应用HE染色、免疫组化蛋白定量、RT-PCR检测等方法，观察动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中TLR6(Toll-like receptors6，TLR6)的表达情况。初步研究并探讨瑞舒伐他汀对TLR6的表达变化的作用和对动脉粥样硬化的影响。
　　方法:
　　本实验共选择36只雄性SD大鼠，平均6-8周龄，体重约180g-200g，先使用普通饲料顺应性喂养7天，然后采取随机抽签的方法将36只大鼠分为两组，分别为:对照组(n=12)和实验组(n=24)。实验组予以高脂饲料喂养，然后在其基础上予以维生素D3肌注+尼古丁灌胃，第4周后，将实验组24只大鼠再随机分为模型组(n=12)和药物组(n=12)，模型组和药物组大鼠继续每日使用高脂饲料喂养。同时，在高脂饲料饲喂的基础上，模型组加用1ml生理盐水对大鼠进行灌胃，连续4周，药物组则给予同等剂量的瑞舒伐他汀(5mg/kg/d)对大鼠进行灌胃，连续4周。实验末测定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。采用HE染色观察大鼠胸主动脉血管的组织形态学特点，采用免疫组化技术分析大鼠胸主动脉TLR6蛋白的表达情况，采用荧光定量PCR技术检测胸主动脉TILR6mRNA的定量表达水平。
　　结果:
　　1、血脂结果:模型组及药物组的TC水平、LDL-C水平与对照组相比均显著上升，其差异具有统计学意义(P＜0.05)，而药物组较之模型组，其TC水平、LDL-C水平明显降低(P＜0.05)。三组之间的TG及HDL-C水平无显著性差异(P＞0.05)。
　　2.病理形态学结果:对照组可见胸主动脉血管各层结构排列正常，管壁比较完整，管壁内膜光滑，内皮细胞排列均匀而整齐。模型组可见胸主动脉血管组织各层结构排列不规则，管壁内膜不完整，可见其明显增厚，同时在管壁内有大量增生的平滑肌细胞，脂质斑块弥漫，可见大量的泡沫细胞聚集，并有大量脂质沉积、钙化及炎症细胞浸润。药物组可见胸主动脉血管组织各层结构排列欠规则，管壁内膜欠完整，可见其稍增厚，同时在管壁内有少量平滑肌细胞增生及炎性细胞浸润，可见少量的泡沫细胞聚集，血管壁脂质沉积和钙化较模型组减轻。
　　3.免疫组织化学结果:TLR6蛋白在大鼠胸主动脉中均可见表达，模型组及药物组的TLR6蛋白表达水平与对照组相比均升高(P＜0.05)，而药物组较之模型组，其TLR6蛋白表达水平降低(P＜0.05)。
　　4.荧光定量PCR检测结果:模型组与对照组及药物组相比，其胸主动脉TLR6 mRNA表达水平较高(P＜0.05)，而药物组较之模型组，其TLR6mRNA表达水平降低(P＜0.05)。
　　结论:
　　1.大鼠动脉粥样硬化模型TLR6的表达水平升高。
　　2.瑞舒伐他汀可能通过下调TLR6的表达从而改善动脉粥样硬化。

目录

摘要

第一章 引言

第二章 材料和方法

2．1 实验动物

2．2 主要药品和试剂

2．3 主要实验仪器

2．4 实验动物分组及模型制备

2．5 生化指标检测

2．6 取材及组织石蜡切片制备

2．7 HE染色

2．8 免疫组织化学染色(ABC法)

2．9 图像处理及组织病理学测量

2．10 RT-PCR检测TLR6mRNA

2．11 统计分析

第三章 结果

3．1 实验动物的一般情况

3．2 各组血脂情况

3．3 HE染色

3．4 免疫组织化学染色

3．5 RT-PCR结果分析

第四章 讨论

4．1 AS模型及实验动物的选择和评价

4．2 TLR6在大鼠动脉粥样硬化模型中的表达及意义

4．3 瑞舒伐他汀干预TLR6的影响

第五章 结论

参考文献

综述

英文缩写词表

在读期间发表的主要学术论文及参与课题

致谢

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